Plasmide Double Nickase (m) TRF1: sc-423339-NIC
- Espèces cibles: mouse
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (m) TRF1 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide TRF1 Double Nickase (m) et le plasmide TRF1 Double Nickase (m2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant Terf1. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (m) TRF1 | sc-423339-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (m2) TRF1 | sc-423339-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
La souris *Terf1* code TRF1, un composant central du complexe shelterin, qui se lie aux répétitions télomériques double brin afin de réguler la longueur et l’architecture des télomères. TRF1 module la dynamique de la réplication des télomères, supprime l’activation aberrante des signaux de dommages à l’ADN aux extrémités des chromosomes et se coordonne avec des facteurs de réplication et de réparation pour maintenir la stabilité du génome. Par ses rôles dans le coiffage des télomères et leur réplication, TRF1 influence des voies liées au contrôle du cycle cellulaire, à la sénescence et à l’instabilité chromosomique. Une fonction de TRF1 ou un maintien des télomères dérégulés sont largement associés, dans des modèles de recherche, au déclin lié à l’âge et à des phénotypes d’instabilité génomique pertinents pour le cancer.
TRF1 Le plasmide double nickase (m) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus Terf1 dans les lignées cellulaires mouse. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de Terf1. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de Terf1. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de Terf1.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.