TPCN2慢病毒激活颗粒(h): sc-402960-LAC

TPCN2（双孔通道2）编码一种内体/溶酶体阳离子通道，可调控细胞内离子通量，并在来自酸性细胞器、依赖 NAADP 的 Ca²⁺ 信号传导中发挥重要作用。通过塑造内体–溶酶体动力学、囊泡运输以及细胞器兴奋性，TPCN2 影响包括自噬、膜融合事件和 Ca²⁺ 依赖性信号级联在内的下游过程。TPCN2 活性差异与色素生物学改变及代谢表型相关；同时，涉及 TPCN2 的内体/溶酶体信号失衡也与神经退行性变和癌细胞行为研究密切相关。这些特征使 TPCN2 成为在人类模型系统中解析溶酶体信号网络及 Ca²⁺ 调控的细胞反应的有用靶点。

TPCN2 慢病毒激活颗粒（h）通过将完整的协同激活介导体（SAM）转录激活系统包装到可直接转导的高滴度慢病毒颗粒中，满足了这一需求，从而能够在更广泛的人类细胞类型中高效上调 TPCN2 表达。

TPCN2 慢病毒激活颗粒（h）通过慢病毒转导递送协同激活介导体（SAM）系统的所有功能组分。该系统包含三种共同转导至靶细胞的颗粒制剂：一种编码与VP64转激活域融合的无催化活性的dCas9（D10A和N863A突变），并携带布拉西定抗性基因； 一种编码MS2-p65-HSF1融合蛋白并携带潮霉素抗性基因的制剂；以及一种编码靶标特异性20 nt sgRNA（与两个MS2 RNA适配体融合）并携带嘌呤霉素抗性基因的制剂。经过慢病毒转导和表达盒的基因组整合后，SAM组分得以稳定表达，并在TPCN2转录起始位点上游的近端启动子区域内的靶位点组装。在此处，VP64、p65和HSF1协同作用，招募内源性转录 machinery，从而驱动内源性TPCN2表达的持续上调。使用无核酸酶活性的 dCas9 可避免引入双链 DNA 断裂，并保留原生的 TPCN2 基因组位点和调控架构。

慢病毒载体具有多项实用优势：稳定的基因组整合支持细胞分裂过程中的可遗传激活；高滴度颗粒制剂免去了内部病毒生产的需要；且与原代细胞、非增殖细胞及转染抗性细胞类型的兼容性，扩大了实验的可及性。可通过嘌呤霉素、潮霉素和布拉西定进行三重抗生素筛选，以确认并富集成功的转导。

仅供研究使用。不用于诊断或治疗。