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TMPRSS11DCRISPR激活质粒(h) | sc-407568-ACT | 20 µg | $397.00 | |||
TMPRSS11DCRISPR激活质粒(h2) | sc-407568-ACT-2 | 20 µg | $397.00 |
TMPRSS11D 编码一种 II 型跨膜丝氨酸蛋白酶,主要在上皮组织中表达,并在细胞表面参与细胞周围的蛋白水解过程。通过切割细胞外或膜相关底物,TMPRSS11D 可影响上皮分化、屏障重塑,以及由蛋白酶激活的信号通路,从而塑造炎症反应与组织稳态反应。膜锚定丝氨酸蛋白酶的活性或表达失调与黏膜完整性改变,以及慢性气道和上消化呼吸道疾病中观察到的异常重塑程序有关。因此,TMPRSS11D 是研究人类细胞中蛋白酶依赖性的上皮微环境调控及情境特异性转录程序的一个有用靶点。
TMPRSS11D CRISPR激活质粒(h)提供了一种靶向、非破坏性的方法,可在不改变底层DNA序列的情况下上调内源性TMPRSS11D的表达。
TMPRSS11D CRISPR激活质粒(h)是一个由三条质粒组成的协同激活介导(SAM)系统,旨在对人类细胞系中的TMPRSS11D基因座进行高效、位点特异性的转录上调。该系统以一种携带两个失活突变(D10A 和 N863A)的无催化活性的 Cas9(dCas9)为核心,这些突变消除了核酸酶活性,同时保留了 DNA 结合能力。该 dCas9 与强效转录激活因子 VP64 融合,并与用于筛选的布拉西定抗性基因共同表达。第二个质粒编码MS2-p65-HSF1融合蛋白——这一二级激活复合物与dCas9-VP64协同作用,并携带潮霉素抗性基因。第三个质粒编码靶标特异性20 nt sgRNA,其与两个MS2 RNA适配体融合,这些适配体可将MS2-p65-HSF1复合物招募至激活位点,并携带嘌呤霉素抗性基因。这三个质粒按1:1:1的质量比递送,以确保系统所有组分的平衡表达。
在靶位点组装完成后,SAM复合物结合于TMPRSS11D转录起始位点上游约200 bp处,VP64、p65和HSF1在此协同作用,招募转录 machinery并驱动内源性TMPRSS11D表达上调。与具有核酸酶活性的Cas9不同, dCas9不会引入双链断裂或修改基因组序列,从而保留了原生的TMPRSS11D位点,并能够研究内源性位点上依赖于TMPRSS11D的转录反应,使其成为功能研究、靶基因鉴定以及在TMPRSS11D表达被沉默或降低的肿瘤细胞中模拟TMPRSS11D通路恢复的宝贵工具。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。