Partículas Lentivirales de Activación (h) TGR5: sc-401875-LAC
- Especies Diana: human
- 200 µl de Partículas Lentivirales de Activación CRISPR/dCas listas para usar
- Partículas Lentivirales de Acitvación (h) TGR5 es un sistema de activación de la trascripción por mediante una activación sinérgica (SAM), diseñado para incrementar la expresión de un gen determinado a través de la tranducción lentiviral de las células
- Partículas Lentivirales de Acitvación (h) TGR5 incluyen los siguientes elementos activadores SAM: plásmido codificador de la nucleasa Cas 9 desactivada, (D10A y N863A) fusionadas al dominio de transactivación VP64; plásmido codificador de la proteína de fusión MS2-p65-HSF1 y un plásmido que codifica la secuencia de diana específica de 20 nt de ARN. También contienen genes de resistencia a blasticidina, higromicina y puromicina.
- El complejo SAM resultante se une en un punto específico a unos 200 -250 nt aguas arriba del inicio de la transcripción del gen diana y ofrece un potente punto de reclutamiento de factores de transcripción para un eficiente incremento de la activación génica
- Los gRNA codificados por el TGR5 Plásmido de activación lentiviral (h) y el TGR5 Plásmido de activación lentiviral (h2) se dirigen a regiones reguladoras distintas del promotor GPBAR1. Puede que haya uno o ambos diseños disponibles
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Partículas Lentivirales de Activación (h) TGR5 | sc-401875-LAC | 200 µl | $455.00 |
El GPBAR1 humano codifica el receptor acoplado a proteína G sensible a ácidos biliares TGR5, un receptor de membrana que se acopla principalmente a Gαs para aumentar el cAMP y activar programas de transcripción vinculados a PKA/CREB. TGR5 integra la señalización de ácidos biliares y lípidos con procesos celulares que incluyen el gasto energético, la actividad mitocondrial y el tono inflamatorio, y modula la secreción y las funciones de barrera en múltiples tejidos. Sus efectos aguas abajo se intersectan con vías metabólicas e inmunitarias, incluida la regulación de la señalización de citocinas y de mediadores endocrinos como GLP-1, lo que convierte a GPBAR1 en un nodo relevante en estudios de disfunción metabólica y de mecanismos de enfermedad asociados a la inflamación. Las alteraciones en la actividad y la expresión de GPBAR1/TGR5 se han investigado en contextos como la biología hepática colestásica, la homeostasis intestinal y las vías de riesgo cardiometabólico.
Las partículas de activación lentiviral TGR5 (h) responden a esta necesidad al empaquetar el sistema completo de activación transcripcional del mediador de activación sinérgica (SAM) en partículas lentivirales de alto título listas para la transducción, lo que permite una regulación al alza eficiente de GPBAR1 en una gama más amplia de tipos de células humanas.
Las partículas de activación lentiviral TGR5 (h) suministran todos los componentes funcionales del sistema mediador de activación sinérgica (SAM) a través de la transducción lentiviral. El sistema comprende tres preparaciones de partículas cotransducidas en las células diana: una que codifica dCas9 catalíticamente inactivo (mutaciones D10A y N863A) fusionado al dominio de transactivación VP64 con un gen de resistencia a la blasticidina; otra que codifica la proteína de fusión MS2-p65-HSF1 con un gen de resistencia a la higromicina; y otra que codifica un ARN guía (sgRNA) específico del objetivo de 20 nt fusionado a dos aptámeros de ARN MS2 con un gen de resistencia a la puromicina. Tras la transducción lentiviral y la integración genómica de los casetes de expresión, los componentes del SAM se expresan de forma estable y se ensamblan en el locus diana dentro de la región promotora proximal, aguas arriba del sitio de inicio de la transcripción GPBAR1, donde VP64, p65 y HSF1 actúan de forma cooperativa para reclutar la maquinaria transcripcional endógena e impulsar la regulación al alza sostenida de la expresión endógena de TGR5. El uso de dCas9 inactivo frente a nucleasas evita la introducción de roturas de ADN de doble cadena y preserva el locus genómico nativo GPBAR1 y la arquitectura reguladora.
El formato lentiviral ofrece varias ventajas prácticas: la integración genómica estable permite la activación hereditaria a lo largo de las divisiones celulares; las preparaciones de partículas de alto título eliminan la necesidad de producir el virus internamente; y la compatibilidad con tipos de células primarias, no divisibles y resistentes a la transfección amplía la accesibilidad experimental. La transducción exitosa puede confirmarse y enriquecerse mediante selección con triple antibiótico utilizando puromicina, higromicina y blasticidina.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.