Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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TEL Double Nickaseプラスミド (h): sc-402207-NIC
- 対象生物種: human
- 20 µg のトランスフェクション準備済み、精製したプラスミドDNA、～20回トランスフェクション
- TEL Double Nickaseプラスミド (h)はペアのプラスミドを含みます。それぞれのプラスミドはD10A変異したCas9 nuclease、及びCRISPR/Cas9 KOの対応よりも高い特異性で遺伝子発現をノックアウトするように設計された標的特異的な20 ntガイドRNA (gRNA)をコードします。
- ペアリングしたガイドRNAは、約20 bpでずらすことにより、ゲノムDNAの特定Cas9媒介のdouble nickingを可能にし、DSBを模造します。
- ペアの1つのプラスミドは選択用のピューロマイシン耐性遺伝子を含みます；ペアのほかの1つのプラスミドは、視覚的にトランスフェクションを確認するGFPマーカーを含みます。
- TELダブルニカースプラスミド（h）およびTELダブルニカースプラスミド（h2）は、ETV6を標的とする異なるペアのgRNA設計をコードしています。いずれか一方、あるいは両方のデザインが利用可能である場合があります
- トランスフェクションの後、遺伝子ノックアウト効果は、抗体を用いたWB、IFまたはIHCによって検定されることができます: TEL 抗体 (E-1): sc-166835
注文情報
| 製品名 | カタログ # | 単位 | 価格 | 数量 | お気に入り | |
TEL Double Nickaseプラスミド (h) | sc-402207-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
TEL Double Nickaseプラスミド (h2) | sc-402207-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
ETV6（TEL）はETSファミリーに属する転写因子をコードしており、主として転写抑制因子として機能して、造血幹細胞および前駆細胞の維持、系譜決定、ならびに恒常性維持のための増殖を制御します。TELは、コリプレッサーやヒストン脱アセチル化酵素（HDAC）関連複合体との相互作用を介して、シグナル伝達からの入力をクロマチン制御と統合し、分化やアポトーシスに関与する遺伝子発現プログラムを形成します。ETV6の破綻はゲノム不安定性や転写制御の異常に寄与し、ETV6は転座、点突然変異、ならびにハプロ不全を通じて血液悪性腫瘍に反復して関与することが知られています。血液発生における中核的な制御点であり、白血病原性の遺伝子融合にも関与することから、TELは腫瘍性転写ネットワークや異常なキナーゼシグナル伝達経路における役割について広く研究されています。
TEL ダブルニカースプラスミド（h）は、human 細胞株における ETV6 座の高特異性編集のために設計された、対となる2つのプラスミドから構成される。各プラスミドは、Cas9 D10Aニカースと、ETV6内の対向するDNA鎖を標的とする異なるsgRNAを発現する。対向するDNA鎖上の隣接する部位に誘導されると、2つのニカースはオフセットした一本鎖切断を生成し、これらが組み合わさってずれた二本鎖切断を生じさせる。これにより、両方のガイドによる協調的なオンターゲット活性が必要となる。生じたDNA切断は、細胞内の内在性修復経路、特に非相同末端結合（NHEJ）によって修復され、その結果、ETV6の機能を阻害する挿入または欠失が生じる。標的座標における2つのsgRNAの結合を必要とするこの二重ニッキング法は、編集の特異性を高め、標的精度に対するさらなる制御が求められる用途において、CRISPR戦略を補完するものである。
編集された細胞を効率的に同定するために、1つのプラスミドはトランスフェクトされた細胞集団を蛍光可視化するためのGFPをコードし、もう1つのプラスミドは抗生物質選別用のプロマイシン耐性遺伝子を保有しています。これらの機能により、共トランスフェクトされた細胞集団の効率的な濃縮が可能となり、ETV6が破壊されたクローンの検証が簡素化されます。
研究用のみ。診断用または治療用ではありません。