TEL Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-402207-NIC

ETV6 (TEL) codifica um fator de transcrição da família ETS que atua predominantemente como um represssor transcricional, controlando a manutenção de células-tronco e progenitoras hematopoéticas, o comprometimento de linhagem e a proliferação homeostática. O TEL integra sinais de vias de sinalização com a regulação da cromatina por meio de interações com correpressores e complexos associados a desacetilases de histonas, moldando programas de expressão gênica envolvidos em diferenciação e apoptose. A disrupção de ETV6 contribui para a instabilidade genômica e para o controle transcricional alterado, e ETV6 é recorrentemente implicado em neoplasias hematológicas por meio de translocações, mutações pontuais e haploinsuficiência. Como um nó central no desenvolvimento do sangue e em fusões gênicas leucemogênicas, o TEL é amplamente estudado por seu papel em redes transcricionais oncogênicas e em vias de sinalização de quinases aberrantes.

TEL O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus ETV6 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de ETV6. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função ETV6. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.

Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com ETV6 interrompido.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.