TCL-1B Plasmide KO CRISPR/Cas9 (h): sc-407297

Panoramica

TCL1B codifica per TCL-1B, un membro della famiglia TCL1 coinvolto nella modulazione della segnalazione intracellulare che governa la crescita e la sopravvivenza delle cellule linfoidi. Le proteine della famiglia TCL-1 sono state associate alla regolazione di vie dipendenti da AKT/PKB e dei programmi trascrizionali a valle che influenzano proliferazione, apoptosi e adattamento metabolico. L’espressione aberrante dei membri della famiglia TCL1 è spesso studiata nel contesto delle neoplasie ematologiche e della biologia disregolata delle cellule B e T, in cui soglie di segnalazione alterate possono contribuire alla trasformazione oncogena e alla progressione della malattia. Di conseguenza, TCL1B viene utilizzato come strumento molecolare per analizzare il rimodellamento delle reti di segnalazione e le vulnerabilità specifiche di linea in modelli cellulari immunitari e tumorali.

Il plasmide CRISPR/Cas9 KO TCL-1B (h) è un pool di plasmidi progettato per la distruzione mirata del gene TCL1B in linee cellulari human. Ciascun plasmide co-esprime un singolo RNA guida (sgRNA) unico che prende di mira un sito distinto all'interno del TCL1B insieme alla nucleasi Cas9 di Streptococcus pyogenes. I plasmidi codificano anche per la GFP, consentendo l'identificazione fluorescente e l'arricchimento delle cellule trasfettate con successo tramite microscopia a fluorescenza o citometria a flusso.

Il design multi-guida aumenta la probabilità di generare inserzioni o delezioni (indels) che interrompono il frame di lettura aperto TCL1B a seguito della formazione di rotture a doppio filamento mediate da Cas9. Le rotture del DNA introdotte dal sistema CRISPR/Cas9 vengono riparate attraverso vie endogene di giunzione non omologa (NHEJ), che spesso provocano mutazioni con spostamento del frame che annullano l'espressione della proteina TCL-1B.

Questo sistema di knockout CRISPR consente la generazione efficiente di modelli cellulari carenti di TCL1B per lo studio della segnalazione di TCL-1B, studi di genomica funzionale, ricerca sulla biologia del cancro e valutazione delle risposte terapeutiche in linee cellulari umane.

Caratteristiche principali

• sgRNA mirati agli esoni TCL1B critici per la funzione di TCL-1B
  Co-espressione di SpCas9 e sgRNA da un singolo plasmide per una somministrazione semplificata
  Reporter GFP per l'identificazione delle cellule trasfettate
  Pool di plasmidi mirati a più siti genomici di TCL1B per migliorare l'efficienza del knockout
  Compatibile con la somministrazione tramite trasfezione

Varianti di progettazione

CRISPR +/- HDR

• Gli gRNA codificati dal TCL-1B CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h) e dal TCL-1B CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h2) prendono di mira siti distinti all'interno del locus TCL1B. Potrebbe essere disponibile uno o entrambi i design di targeting. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.
  I costrutti donatori HDR codificati dal TCL-1B Plasmide HDR (h) e il plasmide HDR TCL-1B (h2) contengono una cassetta di resistenza alla puromicina e un reporter RFP affiancato da bracci di omologia TCL1B per supportare la riparazione diretta dall'omologia in siti bersaglio TCL1B definiti corrispondenti ai disegni CRISPR/Cas9 KO. La disponibilità dei donatori HDR può variare. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.

Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.