TBX2 Lentiviral Ativação Partículas de ativação de lentivirus (h): sc-403078-LAC

TBX2 codifica um fator de transcrição do tipo T-box que se liga a elementos de DNA específicos de sequência para regular programas de expressão gênica do desenvolvimento e a progressão do ciclo celular. Em células humanas, o TBX2 frequentemente atua como um represssor transcricional que ajuda a controlar a proliferação, o escape da senescência e a especificação de linhagem por meio da coordenação com complexos de remodelamento de cromatina e de correpressores. Sua atividade se cruza com vias que governam o controle de G1/S e a diferenciação, e a expressão desregulada de TBX2 foi relatada em múltiplos contextos tumorais, nos quais pode influenciar o crescimento e fenótipos invasivos. Como regulador nuclear, o TBX2 é frequentemente estudado por seu papel em redes transcricionais que moldam a organogênese, a dinâmica epitélio–mesênquima e programas de resposta ao estresse.

As Partículas de Ativação Lentivirais TBX2 (h) respondem a esta necessidade ao encapsular o sistema completo de ativação transcricional do mediador de ativação sinérgica (SAM) em partículas lentivirais de alto título, prontas para transdução, permitindo uma regulação positiva eficiente de TBX2 numa gama mais ampla de tipos de células humanas.

As Partículas de Ativação Lentivirais TBX2 (h) fornecem todos os componentes funcionais do sistema mediador de ativação sinérgica (SAM) através da transdução lentiviral. O sistema compreende três preparações de partículas co-transduzidas em células-alvo: uma que codifica dCas9 cataliticamente inativo (mutações D10A e N863A) fundido ao domínio de transativação VP64 com um gene de resistência à blasticidina; uma que codifica a proteína de fusão MS2-p65-HSF1 com um gene de resistência à higromicina; e uma que codifica um sgRNA de 20 nt específico do alvo, fundido a dois aptâmeros de RNA MS2 com um gene de resistência à puromicina. Após a transdução lentiviral e a integração genómica das cassetes de expressão, os componentes do SAM são expressos de forma estável e reúnem-se no locus-alvo dentro da região promotora proximal a montante do local de início da transcrição TBX2, onde VP64, p65 e HSF1 atuam cooperativamente para recrutar a maquinaria transcricional endógena e impulsionar a regulação positiva sustentada da expressão endógena de TBX2. A utilização de dCas9 inativo em termos de nuclease evita a introdução de quebras de DNA de cadeia dupla e preserva o locus genómico nativo TBX2 e a arquitetura reguladora.

O formato lentiviral oferece várias vantagens práticas: a integração genómica estável suporta a ativação hereditária ao longo das divisões celulares; as preparações de partículas de alto título eliminam a necessidade de produção viral interna; e a compatibilidade com tipos de células primárias, não divisíveis e resistentes à transfecção amplia a acessibilidade experimental. A transdução bem-sucedida pode ser confirmada e enriquecida através de seleção tripla com antibióticos utilizando puromicina, higromicina e blasticidina.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.