TBX19 Plasmide KO CRISPR/Cas9 (h): sc-406919

Panoramica

TBX19 (fattore di trascrizione T-box 19, noto anche come TPIT) è un fattore di trascrizione a espressione ristretta alla linea cellulare, necessario per la specificazione e il mantenimento dell’identità dei corticotrofi ipofisari. Regola programmi di espressione genica che controllano la trascrizione della proopiomelanocortina (POMC) e la segnalazione a valle dell’asse ipotalamo–ipofisi–surrene, integrandosi con vie di sviluppo più ampie dipendenti dai T-box. Modellando la differenziazione endocrina e la funzione delle cellule produttrici di ormoni, TBX19 è ampiamente utilizzato come marcatore e nodo meccanicistico negli studi sull’organogenesi ipofisaria e sul controllo trascrizionale. Alterazioni dell’attività di TBX19 sono state associate a una compromissione della funzione dei corticotrofi e a fenotipi endocrini congeniti, a supporto della sua rilevanza per la ricerca di modellizzazione di malattia sull’insufficienza ipofisaria.

Il plasmide CRISPR/Cas9 KO TBX19 (h) è un pool di plasmidi progettato per la distruzione mirata del gene TBX19 in linee cellulari human. Ciascun plasmide co-esprime un singolo RNA guida (sgRNA) unico che prende di mira un sito distinto all'interno del TBX19 insieme alla nucleasi Cas9 di Streptococcus pyogenes. I plasmidi codificano anche per la GFP, consentendo l'identificazione fluorescente e l'arricchimento delle cellule trasfettate con successo tramite microscopia a fluorescenza o citometria a flusso.

Il design multi-guida aumenta la probabilità di generare inserzioni o delezioni (indels) che interrompono il frame di lettura aperto TBX19 a seguito della formazione di rotture a doppio filamento mediate da Cas9. Le rotture del DNA introdotte dal sistema CRISPR/Cas9 vengono riparate attraverso vie endogene di giunzione non omologa (NHEJ), che spesso provocano mutazioni con spostamento del frame che annullano l'espressione della proteina TBX19.

Questo sistema di knockout CRISPR consente la generazione efficiente di modelli cellulari carenti di TBX19 per lo studio della segnalazione di TBX19, studi di genomica funzionale, ricerca sulla biologia del cancro e valutazione delle risposte terapeutiche in linee cellulari umane.

Caratteristiche principali

• sgRNA mirati agli esoni TBX19 critici per la funzione di TBX19
  Co-espressione di SpCas9 e sgRNA da un singolo plasmide per una somministrazione semplificata
  Reporter GFP per l'identificazione delle cellule trasfettate
  Pool di plasmidi mirati a più siti genomici di TBX19 per migliorare l'efficienza del knockout
  Compatibile con la somministrazione tramite trasfezione

Varianti di progettazione

CRISPR +/- HDR

• Gli gRNA codificati dal TBX19 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h) e dal TBX19 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h2) prendono di mira siti distinti all'interno del locus TBX19. Potrebbe essere disponibile uno o entrambi i design di targeting. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.
  I costrutti donatori HDR codificati dal TBX19 Plasmide HDR (h) e il plasmide HDR TBX19 (h2) contengono una cassetta di resistenza alla puromicina e un reporter RFP affiancato da bracci di omologia TBX19 per supportare la riparazione diretta dall'omologia in siti bersaglio TBX19 definiti corrispondenti ai disegni CRISPR/Cas9 KO. La disponibilità dei donatori HDR può variare. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.

Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.