Tak1 Lentiviral Activation Particles (m2): sc-424044-LAC-2

マウスのMap3k7はTAK1（TGF-β活性化キナーゼ1）をコードしており、TAK1はTGF-β/BMP受容体、TNF受容体スーパーファミリー、Toll様受容体、IL-1受容体複合体からのシグナルを統合して、下流のNF-κBおよびMAPKカスケード（JNK、p38、ERK）を活性化するMAP3Kである。TAK1はTABアダプターを介してMAP2KやIKK複合体をリン酸化することで、炎症および自然免疫シグナル伝達、ストレス応答、アポトーシス／生存の決定、ならびに多様な細胞種における組織恒常性を制御する。TAK1シグナルの破綻は、炎症性疾患、自己免疫、がん関連シグナルネットワークのモデルにおいて、異常なサイトカイン産生、バリア機能の低下、病的リモデリングと関連づけられている。Map3k7を標的とした遺伝子編集は、マウス細胞およびin vivo系において、ノックアウト／ノックイン、エピトープタグ付加、あるいはキナーゼドメインの改変を用い、受容体近傍シグナルの機序解析、経路間クロストーク、細胞種特異的表現型の解明を可能にする。

Tak1 レンチウイルス活性化粒子（m2）は、完全な相乗的活性化メディエーター（SAM）転写活性化システムを、トランスダクション可能な高力価レンチウイルス粒子に封入することでこのニーズに対応し、より広範なヒト細胞タイプにおいて効率的なMap3k7の発現上昇を可能にします。

Tak1 レンチウイルス活性化粒子（m2）は、レンチウイルス媒介を介して、シナジー活性化メディエーター（SAM）システムのすべての機能的構成要素を届ける。このシステムは、標的細胞へ共導入される3種類の粒子製剤で構成されています。1つは、VP64転写活性化ドメインとブラスティシジン耐性遺伝子を融合させた、触媒活性のないdCas9（D10AおよびN863A変異）をコードするものです。ヒグロマイシン耐性遺伝子を有するMS2-p65-HSF1融合タンパク質をコードするもの；および、2つのMS2 RNAアプタマーと融合した標的特異的20塩基対sgRNAをコードし、プロマイシン耐性遺伝子を有するもの。レンチウイルスによる導入および発現カセットのゲノムへの組み込み後、SAM構成要素は安定して発現し、Map3k7転写開始点の上流にある近位プロモーター領域内の標的座に集合する。そこでは、VP64、p65、およびHSF1が協調して作用し、内因性の転写機構を動員して、内因性Tak1の発現を持続的に上向きに調節する。ヌクレアーゼ不活性型dCas9を使用することで、二本鎖DNA切断の導入を回避し、天然のMap3k7ゲノム座および制御機構を維持します。

レンチウイルス形式には、いくつかの実用的な利点があります。安定したゲノム組み込みにより、細胞分裂を経ても遺伝的に継承される活性化がサポートされます。高力価の粒子調製により、施設内でのウイルス生産の必要性がなくなります。また、初代培養細胞、非増殖性細胞、およびトランスフェクション抵抗性細胞との互換性により、実験の適用範囲が広がります。成功したトランスダクションは、プロマイシン、ハイグロマイシン、ブラスティシジンを用いた三重抗生物質選別により確認および選別が可能である。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。