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survivin慢病毒激活颗粒(h) | sc-400205-LAC | 200 µl | $455.00 |
人类 BIRC5 基因编码 survivin(存活素),它属于具有双重功能的凋亡抑制蛋白(IAP)家族成员,可协调有丝分裂进程与细胞存活。Survivin 是染色体乘客复合体(chromosomal passenger complex)的核心组分,参与支持动粒–微管附着、纺锤体检查点调控以及胞质分裂,同时还能调节依赖半胱天冬酶(caspase)的凋亡信号传导。BIRC5 的表达与细胞周期调控和应激反应密切相关,其表达升高常与增殖状态相关,并在肿瘤生物学中与凋亡失调密切相伴。作为连接有丝分裂与存活通路的枢纽调控因子,survivin 被广泛用于研究基因组不稳定性机制、治疗应答表型以及基于生物标志物的通路分析。
survivin 慢病毒激活颗粒(h)通过将完整的协同激活介导体(SAM)转录激活系统包装到可直接转导的高滴度慢病毒颗粒中,满足了这一需求,从而能够在更广泛的人类细胞类型中高效上调 BIRC5 表达。
survivin 慢病毒激活颗粒(h)通过慢病毒转导递送协同激活介导体(SAM)系统的所有功能组分。该系统包含三种共同转导至靶细胞的颗粒制剂:一种编码与VP64转激活域融合的无催化活性的dCas9(D10A和N863A突变),并携带布拉西定抗性基因; 一种编码MS2-p65-HSF1融合蛋白并携带潮霉素抗性基因的制剂;以及一种编码靶标特异性20 nt sgRNA(与两个MS2 RNA适配体融合)并携带嘌呤霉素抗性基因的制剂。经过慢病毒转导和表达盒的基因组整合后,SAM组分得以稳定表达,并在BIRC5转录起始位点上游的近端启动子区域内的靶位点组装。在此处,VP64、p65和HSF1协同作用,招募内源性转录 machinery,从而驱动内源性survivin表达的持续上调。使用无核酸酶活性的 dCas9 可避免引入双链 DNA 断裂,并保留原生的 BIRC5 基因组位点和调控架构。
慢病毒载体具有多项实用优势:稳定的基因组整合支持细胞分裂过程中的可遗传激活;高滴度颗粒制剂免去了内部病毒生产的需要;且与原代细胞、非增殖细胞及转染抗性细胞类型的兼容性,扩大了实验的可及性。可通过嘌呤霉素、潮霉素和布拉西定进行三重抗生素筛选,以确认并富集成功的转导。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。