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Superoxide Dismutase 2/SOD2CRISPR激活质粒(h) | sc-400230-ACT | 20 µg | $397.00 | |||
Superoxide Dismutase 2/SOD2CRISPR激活质粒(h2) | sc-400230-ACT-2 | 20 µg | $397.00 |
人类 SOD2 基因编码线粒体锰超氧化物歧化酶,可将超氧阴离子自由基转化为过氧化氢和氧气,从而在线粒体基质中构成主要的抗氧化防御。SOD2 通过限制对线粒体 DNA、蛋白质和脂质的氧化损伤,帮助维持呼吸链功能,并支持细胞氧化还原稳态、应激适应以及凋亡信号传导。SOD2 活性与多条对 ROS 敏感的通路相互整合,包括 NRF2 介导的抗氧化程序、炎症信号,以及线粒体质量控制过程(如线粒体自噬)。SOD2 的表达或功能异常与多种模型中观察到的氧化应激表型相关,涵盖癌症生物学、神经退行性变、心脏代谢功能障碍和炎症性疾病,因此它也是研究线粒体 ROS 机制时的常用靶点。
Superoxide Dismutase 2/SOD2 CRISPR激活质粒(h)提供了一种靶向、非破坏性的方法,可在不改变底层DNA序列的情况下上调内源性SOD2的表达。
Superoxide Dismutase 2/SOD2 CRISPR激活质粒(h)是一个由三条质粒组成的协同激活介导(SAM)系统,旨在对人类细胞系中的SOD2基因座进行高效、位点特异性的转录上调。该系统以一种携带两个失活突变(D10A 和 N863A)的无催化活性的 Cas9(dCas9)为核心,这些突变消除了核酸酶活性,同时保留了 DNA 结合能力。该 dCas9 与强效转录激活因子 VP64 融合,并与用于筛选的布拉西定抗性基因共同表达。第二个质粒编码MS2-p65-HSF1融合蛋白——这一二级激活复合物与dCas9-VP64协同作用,并携带潮霉素抗性基因。第三个质粒编码靶标特异性20 nt sgRNA,其与两个MS2 RNA适配体融合,这些适配体可将MS2-p65-HSF1复合物招募至激活位点,并携带嘌呤霉素抗性基因。这三个质粒按1:1:1的质量比递送,以确保系统所有组分的平衡表达。
在靶位点组装完成后,SAM复合物结合于SOD2转录起始位点上游约200 bp处,VP64、p65和HSF1在此协同作用,招募转录 machinery并驱动内源性Superoxide Dismutase 2/SOD2表达上调。与具有核酸酶活性的Cas9不同, dCas9不会引入双链断裂或修改基因组序列,从而保留了原生的SOD2位点,并能够研究内源性位点上依赖于Superoxide Dismutase 2/SOD2的转录反应,使其成为功能研究、靶基因鉴定以及在SOD2表达被沉默或降低的肿瘤细胞中模拟Superoxide Dismutase 2/SOD2通路恢复的宝贵工具。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。