Non dati CRISPR: l'immagine illustra la qualità degli anticorpi per la visualizzazione dei risultati degli esperimenti CRISPR.
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STAU1 Plasmide KO CRISPR/Cas9 (m): sc-423181
- Specie Target: mouse
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- STAU1 Il plasmide CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) è un pool di plasmidi, ciascuno dei quali codifica la nucleasi Cas9 e un RNA guida (gRNA) specifico per il bersaglio di 20 nt, progettato per la massima efficienza di knockout utilizzando sequenze derivate dalla libreria GeCKO v2
- Le sequenze gRNA indirizzano Cas9 a indurre rotture a doppio filamento (DSB) sito-specifiche nel locus genomico STAU1, con conseguente knockout genico tramite giunzione non omologa (NHEJ)
- I geni di resistenza alla puromicina e RFP sono fiancheggiati da siti LoxP, consentendo la rimozione dei marcatori di selezione tramite la ricombinasi Cre (Cre Vector: sc-418923) dopo aver stabilito linee cellulari knockout stabili
- In seguito alla trasfezione, l'efficienza dll'attivazione genica può essere testata con WB, IF o IHC utilizzando l'anticorpo: STAU1 Antibody (C-4): sc-390820
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
STAU1 Plasmide KO CRISPR/Cas9 (m) | sc-423181 | 20 µg | $397.00 |
Panoramica
Il gene murino *Stau1* codifica STAU1, una proteina legante RNA a doppio filamento che media la degradazione dell’mRNA dipendente da Staufen e regola la localizzazione, la stabilità e la traduzione dell’mRNA. STAU1 partecipa al controllo genico post-trascrizionale attraverso l’assemblaggio di complessi ribonucleoproteici, collegando la sorveglianza dell’RNA a processi quali la dinamica dei granuli da stress e il trasporto lungo il citoscheletro. Nelle cellule dei mammiferi, un’attività alterata di STAU1 è stata associata a un metabolismo dell’RNA disregolato che compromette la funzione neuronale e l’omeostasi muscolare, rendendolo rilevante per studi su neurodegenerazione e fenotipi neuromuscolari. In quanto nodo nelle reti di regolazione dell’RNA, STAU1 rappresenta un punto di accesso pratico per analizzare come le decisioni sul destino dell’mRNA plasmino lo stato cellulare e l’output del proteoma.
Il plasmide CRISPR/Cas9 KO STAU1 (m) è un pool di plasmidi progettato per la distruzione mirata del gene Stau1 in linee cellulari mouse. Ciascun plasmide co-esprime un singolo RNA guida (sgRNA) unico che prende di mira un sito distinto all'interno del Stau1 insieme alla nucleasi Cas9 di Streptococcus pyogenes. I plasmidi codificano anche per la GFP, consentendo l'identificazione fluorescente e l'arricchimento delle cellule trasfettate con successo tramite microscopia a fluorescenza o citometria a flusso.
Il design multi-guida aumenta la probabilità di generare inserzioni o delezioni (indels) che interrompono il frame di lettura aperto Stau1 a seguito della formazione di rotture a doppio filamento mediate da Cas9. Le rotture del DNA introdotte dal sistema CRISPR/Cas9 vengono riparate attraverso vie endogene di giunzione non omologa (NHEJ), che spesso provocano mutazioni con spostamento del frame che annullano l'espressione della proteina STAU1.
Questo sistema di knockout CRISPR consente la generazione efficiente di modelli cellulari carenti di Stau1 per lo studio della segnalazione di STAU1, studi di genomica funzionale, ricerca sulla biologia del cancro e valutazione delle risposte terapeutiche in linee cellulari umane.
Caratteristiche principali
- sgRNA mirati agli esoni Stau1 critici per la funzione di STAU1
Co-espressione di SpCas9 e sgRNA da un singolo plasmide per una somministrazione semplificata
Reporter GFP per l'identificazione delle cellule trasfettate
Pool di plasmidi mirati a più siti genomici di Stau1 per migliorare l'efficienza del knockout
Compatibile con la somministrazione tramite trasfezione
Varianti di progettazione
CRISPR +/- HDR
- Gli gRNA codificati dal STAU1 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (m) e dal STAU1 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (m2) prendono di mira siti distinti all'interno del locus Stau1. Potrebbe essere disponibile uno o entrambi i design di targeting. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.
I costrutti donatori HDR codificati dal STAU1 Plasmide HDR (m) e il plasmide HDR STAU1 (m2) contengono una cassetta di resistenza alla puromicina e un reporter RFP affiancato da bracci di omologia Stau1 per supportare la riparazione diretta dall'omologia in siti bersaglio Stau1 definiti corrispondenti ai disegni CRISPR/Cas9 KO. La disponibilità dei donatori HDR può variare. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.