SR-A Plasmide KO CRISPR/Cas9 (m2): sc-422832-KO-2

Panoramica

Msr1 codifica il recettore scavenger di classe A (SR-A), un recettore di riconoscimento di pattern arricchito nei macrofagi che lega lipoproteine modificate, cellule apoptotiche e ligandi microbici per coordinare l’uptake e la segnalazione dell’immunità innata. SR-A promuove l’endocitosi mediata da recettore e la fagocitosi, modulando la gestione dei lipidi, le risposte infiammatorie e la risoluzione del danno tissutale attraverso il crosstalk con le vie dei recettori Toll-like e con le reti di citochine. Nei modelli murini, un’attività alterata di Msr1/SR-A è stata associata a una formazione deregolata di cellule schiumose, a infiammazione sterile e a una maggiore suscettibilità alle infezioni, rendendolo rilevante per studi su processi simili all’aterosclerosi, sulla neuroinfiammazione e sui meccanismi delle malattie metaboliche. La sua espressione nelle linee mieloidi supporta inoltre la ricerca sulla polarizzazione dei macrofagi, sull’elaborazione dell’antigene e sulle vie di clearance in microambienti tissutali complessi.

Il plasmide CRISPR/Cas9 KO SR-A (m2) è un pool di plasmidi progettato per la distruzione mirata del gene Msr1 in linee cellulari mouse. Ciascun plasmide co-esprime un singolo RNA guida (sgRNA) unico che prende di mira un sito distinto all'interno del Msr1 insieme alla nucleasi Cas9 di Streptococcus pyogenes. I plasmidi codificano anche per la GFP, consentendo l'identificazione fluorescente e l'arricchimento delle cellule trasfettate con successo tramite microscopia a fluorescenza o citometria a flusso.

Il design multi-guida aumenta la probabilità di generare inserzioni o delezioni (indels) che interrompono il frame di lettura aperto Msr1 a seguito della formazione di rotture a doppio filamento mediate da Cas9. Le rotture del DNA introdotte dal sistema CRISPR/Cas9 vengono riparate attraverso vie endogene di giunzione non omologa (NHEJ), che spesso provocano mutazioni con spostamento del frame che annullano l'espressione della proteina SR-A.

Questo sistema di knockout CRISPR consente la generazione efficiente di modelli cellulari carenti di Msr1 per lo studio della segnalazione di SR-A, studi di genomica funzionale, ricerca sulla biologia del cancro e valutazione delle risposte terapeutiche in linee cellulari umane.

Caratteristiche principali

• sgRNA mirati agli esoni Msr1 critici per la funzione di SR-A
  Co-espressione di SpCas9 e sgRNA da un singolo plasmide per una somministrazione semplificata
  Reporter GFP per l'identificazione delle cellule trasfettate
  Pool di plasmidi mirati a più siti genomici di Msr1 per migliorare l'efficienza del knockout
  Compatibile con la somministrazione tramite trasfezione

Varianti di progettazione

CRISPR +/- HDR

• Gli gRNA codificati dal SR-A CRISPR/Cas9 KO Plasmid (m) e dal SR-A CRISPR/Cas9 KO Plasmid (m2) prendono di mira siti distinti all'interno del locus Msr1. Potrebbe essere disponibile uno o entrambi i design di targeting. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.
  I costrutti donatori HDR codificati dal SR-A Plasmide HDR (m) e il plasmide HDR SR-A (m2) contengono una cassetta di resistenza alla puromicina e un reporter RFP affiancato da bracci di omologia Msr1 per supportare la riparazione diretta dall'omologia in siti bersaglio Msr1 definiti corrispondenti ai disegni CRISPR/Cas9 KO. La disponibilità dei donatori HDR può variare. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.

Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.