Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
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SP-D Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m): sc-422903
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- SP-D O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico SP-D, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:SP-D Anticorpo (1A10A9): sc-53138
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
SP-D Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) | sc-422903 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
Sftpd codifica a proteína do surfactante D (SP-D), uma coletina secretada produzida principalmente por células alveolares do tipo II e células de Clara, que contribui para a homeostase do surfactante pulmonar e para a defesa imune inata nas superfícies mucosas. A SP-D reconhece padrões de carboidratos em microrganismos e em células apoptóticas, promovendo opsonização, aglutinação e modulação da atividade de macrófagos e neutrófilos por meio de interações dependentes de lectina. Do ponto de vista funcional, a SP-D se integra a vias que controlam a proteostase alveolar, a sinalização de citocinas inflamatórias e as respostas ao estresse oxidativo, que moldam a integridade da barreira das vias aéreas. Alterações na atividade de Sftpd/SP-D estão associadas a inflamação e remodelamento pulmonares desregulados, tornando-a relevante para o estudo de mecanismos de lesão pulmonar aguda, fenótipos semelhantes aos de asma e DPOC, e suscetibilidade à infecção respiratória em modelos murinos.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO SP-D (m) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene Sftpd em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do Sftpd, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do Sftpd na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína SP-D.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de Sftpd para a investigação da sinalização de SP-D, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) Sftpd críticos para a função SP-D
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos Sftpd para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo SP-D Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) e pelo SP-D Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m2) têm como alvo locais distintos dentro do locus Sftpd. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo SP-D Plasmídeo HDR (m) e o Plasmídeo HDR SP-D (m2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia Sftpd para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo Sftpd definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.