Sox9 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-400143-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- Sox9O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase Sox9 (h) e o Plasmídeo Double Nickase Sox9 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para SOX9. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:Sox9 Anticorpo (E-9): sc-166505
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
Sox9 Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-400143-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Sox9 Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-400143-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
SOX9 codifica o fator de transcrição Sox9, uma proteína de ligação ao DNA do tipo grupo de alta mobilidade (HMG) que regula a especificação de linhagem e programas de diferenciação em múltiplos tecidos. No desenvolvimento e na homeostase do adulto, Sox9 integra sinais como TGF-β/BMP, WNT/β-catenina, Hedgehog e Notch para controlar redes gênicas envolvidas na condrogênese, na manutenção de células-tronco/progenitoras e em decisões de destino de células epiteliais. A atividade de SOX9 influencia a produção de matriz extracelular e a dinâmica do ciclo celular por meio do controle transcricional direto de loci-alvo e da cooperação com fatores de transcrição parceiros. A expressão ou função desregulada de SOX9 tem sido associada a distúrbios esqueléticos congênitos e contribui para estados patogênicos que envolvem diferenciação aberrante e programas transcricionais oncogênicos, tornando-o um alvo amplamente utilizado em estudos mecanísticos de desenvolvimento e biologia de doenças.
Sox9 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus SOX9 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de SOX9. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função SOX9. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com SOX9 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.