Sox-5 CRISPR Activationプラスミド (h): sc-401854-ACT

SOX5は、HMGボックスを介してDNAに結合するSOXファミリーの一員である転写因子Sox-5をコードしており、発生および組織の恒常性維持の過程で、系譜特異的な遺伝子発現プログラムを統合的に制御します。ヒト細胞においてSox-5は、エンハンサー活性を調節し、他の転写調節因子と協調することで、分化・増殖・細胞運命決定を形作り、軟骨形成および神経新生の制御に寄与します。SOX5に関連する転写ネットワークは、細胞外マトリックスの構築や神経成熟を制御する経路と交差しており、その活性が組織構築や神経回路形成に影響するプロセスと結び付いていることを示しています。SOX5の発現や機能の破綻は、発達障害やがんに伴う転写ネットワークの再配線に関与するとされ、遺伝子型から表現型への関係を研究する上で重要な結節点としての価値を裏付けています。

Sox-5 CRISPR活性化プラスミド（h）は、基盤となるDNA配列を変更することなく、内因性SOX5の発現を標的化し、非破壊的にアップレギュレートするアプローチを提供します。

Sox-5 CRISPR 活性化プラスミド (h) は、ヒト細胞株における SOX5 遺伝子座の高効率かつ部位特異的な転写アップレギュレーションのために設計された、3 つのプラスミドからなる相乗的活性化メディエーター (SAM) システムです。このシステムは、DNA結合能を維持しつつヌクレアーゼ活性を失わせる2つの不活性化変異（D10AおよびN863A）を有する、触媒活性のないCas9（dCas9）を中核としています。このdCas9は、強力な転写活性化因子であるVP64と融合しており、選別用のブラスティシジン耐性遺伝子と共に共発現します。2番目のプラスミドは、dCas9-VP64と協調して機能する二次活性化複合体であるMS2-p65-HSF1融合タンパク質をコードしており、ヒグロマイシン耐性遺伝子と共に発現する。3番目のプラスミドは、標的特異的な20塩基対のsgRNAをコードしており、これはMS2-p65-HSF1複合体を活性化部位に誘導する2つのMS2 RNAアプタマーと融合しており、さらにピューロマイシン耐性遺伝子が付随している。これら3つのプラスミドは、システム構成要素すべてが均等に発現するよう、質量比1:1:1で導入される。

標的遺伝子座に集合すると、SAM複合体はSOX5転写開始点の上流約200 bpの領域に結合し、そこでVP64、p65、およびHSF1が協調して転写装置を動員し、内因性Sox-5の発現上昇を促進する。ヌクレアーゼ活性を持つCas9とは異なり、 dCas9は二本鎖切断を導入したりゲノム配列を改変したりしないため、天然のSOX5遺伝子座が保持され、内因性遺伝子座におけるSox-5依存性の転写応答の研究が可能となります。これにより、機能解析、標的遺伝子の同定、およびSOX5発現が沈黙または低下した腫瘍細胞におけるSox-5経路の回復のモデル化を行う上で、貴重なツールとなります。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。