Sox-13 Plasmide KO CRISPR/Cas9 (m): sc-423081

Panoramica

Il gene murino Sox13 codifica il fattore di trascrizione Sox-13, un membro della famiglia SOX che si lega al DNA tramite un dominio HMG box e contribuisce a programmare l’espressione genica specifica di linea. Sox-13 è implicato nella regolazione della differenziazione dei linfociti T, influenzando in particolare lo sviluppo delle cellule T γδ e le reti trascrizionali associate che controllano le decisioni di destino delle cellule immunitarie. Attraverso il suo ruolo nel controllo trascrizionale, Sox-13 può modulare vie legate alla segnalazione del recettore dell’antigene e a programmi di differenziazione guidati dalle citochine. Un’attività di SOX13 disregolata è stata associata a squilibri immunitari e a fenotipi infiammatori, rendendolo rilevante per studi meccanicistici sullo sviluppo del sistema immunitario e per modelli di malattie immuno-mediate.

Il plasmide CRISPR/Cas9 KO Sox-13 (m) è un pool di plasmidi progettato per la distruzione mirata del gene Sox13 in linee cellulari mouse. Ciascun plasmide co-esprime un singolo RNA guida (sgRNA) unico che prende di mira un sito distinto all'interno del Sox13 insieme alla nucleasi Cas9 di Streptococcus pyogenes. I plasmidi codificano anche per la GFP, consentendo l'identificazione fluorescente e l'arricchimento delle cellule trasfettate con successo tramite microscopia a fluorescenza o citometria a flusso.

Il design multi-guida aumenta la probabilità di generare inserzioni o delezioni (indels) che interrompono il frame di lettura aperto Sox13 a seguito della formazione di rotture a doppio filamento mediate da Cas9. Le rotture del DNA introdotte dal sistema CRISPR/Cas9 vengono riparate attraverso vie endogene di giunzione non omologa (NHEJ), che spesso provocano mutazioni con spostamento del frame che annullano l'espressione della proteina Sox-13.

Questo sistema di knockout CRISPR consente la generazione efficiente di modelli cellulari carenti di Sox13 per lo studio della segnalazione di Sox-13, studi di genomica funzionale, ricerca sulla biologia del cancro e valutazione delle risposte terapeutiche in linee cellulari umane.

Caratteristiche principali

• sgRNA mirati agli esoni Sox13 critici per la funzione di Sox-13
  Co-espressione di SpCas9 e sgRNA da un singolo plasmide per una somministrazione semplificata
  Reporter GFP per l'identificazione delle cellule trasfettate
  Pool di plasmidi mirati a più siti genomici di Sox13 per migliorare l'efficienza del knockout
  Compatibile con la somministrazione tramite trasfezione

Varianti di progettazione

CRISPR +/- HDR

• Gli gRNA codificati dal Sox-13 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (m) e dal Sox-13 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (m2) prendono di mira siti distinti all'interno del locus Sox13. Potrebbe essere disponibile uno o entrambi i design di targeting. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.
  I costrutti donatori HDR codificati dal Sox-13 Plasmide HDR (m) e il plasmide HDR Sox-13 (m2) contengono una cassetta di resistenza alla puromicina e un reporter RFP affiancato da bracci di omologia Sox13 per supportare la riparazione diretta dall'omologia in siti bersaglio Sox13 definiti corrispondenti ai disegni CRISPR/Cas9 KO. La disponibilità dei donatori HDR può variare. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.

Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.