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SNAI 1CRISPR激活质粒(h) | sc-400244-ACT | 20 µg | $397.00 | |||
SNAI 1CRISPR激活质粒(h2) | sc-400244-ACT-2 | 20 µg | $397.00 |
SNAI1 编码 SNAI1(Snail),是一种锌指型转录抑制因子。它通过直接抑制上皮相关基因程序(包括 CDH1)并促进间充质表型,来协调上皮–间充质转化(EMT)。通过与 TGF-β、Wnt/β-连环蛋白(β-catenin)、Notch 以及炎症信号网络的相互作用,SNAI1 在发育与组织重塑过程中调控细胞黏附、极性、运动能力和谱系可塑性。SNAI1 活性失调常与肿瘤进展相关表型有关,如侵袭、转移播散、干细胞样状态及治疗耐受;同时也参与纤维化相关的转录程序。这些特征使 SNAI1 成为研究 EMT 的转录调控、染色质重塑以及微环境驱动的细胞状态转换的关键枢纽。
SNAI 1 CRISPR激活质粒(h)提供了一种靶向、非破坏性的方法,可在不改变底层DNA序列的情况下上调内源性SNAI1的表达。
SNAI 1 CRISPR激活质粒(h)是一个由三条质粒组成的协同激活介导(SAM)系统,旨在对人类细胞系中的SNAI1基因座进行高效、位点特异性的转录上调。该系统以一种携带两个失活突变(D10A 和 N863A)的无催化活性的 Cas9(dCas9)为核心,这些突变消除了核酸酶活性,同时保留了 DNA 结合能力。该 dCas9 与强效转录激活因子 VP64 融合,并与用于筛选的布拉西定抗性基因共同表达。第二个质粒编码MS2-p65-HSF1融合蛋白——这一二级激活复合物与dCas9-VP64协同作用,并携带潮霉素抗性基因。第三个质粒编码靶标特异性20 nt sgRNA,其与两个MS2 RNA适配体融合,这些适配体可将MS2-p65-HSF1复合物招募至激活位点,并携带嘌呤霉素抗性基因。这三个质粒按1:1:1的质量比递送,以确保系统所有组分的平衡表达。
在靶位点组装完成后,SAM复合物结合于SNAI1转录起始位点上游约200 bp处,VP64、p65和HSF1在此协同作用,招募转录 machinery并驱动内源性SNAI 1表达上调。与具有核酸酶活性的Cas9不同, dCas9不会引入双链断裂或修改基因组序列,从而保留了原生的SNAI1位点,并能够研究内源性位点上依赖于SNAI 1的转录反应,使其成为功能研究、靶基因鉴定以及在SNAI1表达被沉默或降低的肿瘤细胞中模拟SNAI 1通路恢复的宝贵工具。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。