SmcX Plasmídeo duplo de Nickase (m): sc-423030-NIC
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- SmcXO plasmídeo de dupla Nickase (m) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase SmcX (m) e o Plasmídeo Double Nickase SmcX (m2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para Kdm5c. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:SmcX Anticorpo (G-10): sc-376255
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
SmcX Plasmídeo duplo de Nickase (m) | sc-423030-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
SmcX Plasmídeo duplo de Nickase (m2) | sc-423030-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Kdm5c (SmcX) codifica uma desmetilase de lisina em histonas ligada ao cromossomo X, que remove as marcas H3K4me2/3 para moldar programas de transcrição e a acessibilidade da cromatina em células de camundongo. SmcX participa da regulação epigenética do desenvolvimento neuronal, da função sináptica e de decisões de destino celular ao modular a atividade de promotores e enhancers em vias de expressão gênica dependentes da RNA polimerase II. A disrupção de Kdm5c altera a transcrição dependente de atividade e está associada a fenótipos do neurodesenvolvimento, oferecendo um ponto de entrada mecanístico para estudar a regulação da cognição e do comportamento dirigida pela cromatina. Além disso, o controle, dependente de Kdm5c, da diferenciação e da transcrição associada ao ciclo celular sustenta pesquisas sobre remodelamento epigenético específico de contexto em diferentes tecidos.
SmcX O Plasmídeo de Nickase Dupla (m) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus Kdm5c em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de Kdm5c. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função Kdm5c. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com Kdm5c interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.