Smad6 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-401411-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- Smad6O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase Smad6 (h) e o Plasmídeo Double Nickase Smad6 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para SMAD6. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:Smad6 Anticorpo (D-4): sc-25321
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
Smad6 Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-401411-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Smad6 Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-401411-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
SMAD6 codifica a Smad6, uma SMAD inibitória que antagoniza a sinalização das superfamílias BMP e TGF-β ao interferir na fosforilação de SMADs reguladas por receptor e na formação de complexos transcricionais a jusante. Ao atenuar programas dependentes de BMP, a Smad6 contribui para o controle da diferenciação osteogênica, da morfogênese vascular e cardíaca e da regulação, dependente do contexto, de respostas inflamatórias e da matriz extracelular. Alterações na atividade de SMAD6 têm sido associadas na literatura a fenótipos cardiovasculares e craniofaciais congênitos e a processos desregulados de remodelamento tecidual nos quais o equilíbrio BMP/TGF-β é crítico. Como regulador de feedback negativo, SMAD6 é frequentemente estudado para definir limiares da via, duração do sinal e a comunicação cruzada com MAPK e com a degradação mediada por ubiquitina de componentes da sinalização.
Smad6 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus SMAD6 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de SMAD6. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função SMAD6. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com SMAD6 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.