Slit3 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-402553-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- Slit3O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase Slit3 (h) e o Plasmídeo Double Nickase Slit3 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para SLIT3. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:Slit3 Anticorpo (3C5): sc-293463
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
Slit3 Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-402553-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Slit3 Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-402553-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
SLIT3 codifica a Slit3, um sinal de orientação secretado que atua principalmente por meio de receptores ROBO para regular o direcionamento axonal, a migração neuronal e a padronização de tecidos. Além do desenvolvimento do sistema nervoso, SLIT3 contribui para a comunicação célula–célula, influenciando a dinâmica do citoesqueleto, a motilidade direcional e a organização vascular e do tecido conjuntivo. A sinalização Slit/ROBO interage com processos relacionados a GTPases Rho e a adesões focais, que moldam programas de adesão e migração em múltiplos tipos celulares. A desregulação da expressão de SLIT3 ou da atividade da via tem sido associada a fenótipos de desenvolvimento alterados e tem sido investigada em contextos que envolvem migração celular aberrante e biologia tumoral.
Slit3 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus SLIT3 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de SLIT3. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função SLIT3. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com SLIT3 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.