Slfn3 Plasmide KO CRISPR/Cas9 (m): sc-423018

Panoramica

Slfn3 (schlafen 3) codifica un membro della famiglia Schlafen, implicata nella regolazione della differenziazione cellulare, della proliferazione e di programmi associati all’immunità nei tessuti murini. Le proteine Schlafen sono comunemente collegate alla segnalazione responsiva agli interferoni, alla modulazione della traduzione e del metabolismo dell’RNA e a un controllo dipendente dal contesto della progressione del ciclo cellulare. In modelli epiteliali, Slfn3 è stato studiato come fattore associato allo stato di differenziazione e all’espressione di geni legati alla funzione di barriera, collegandolo a vie che influenzano l’omeostasi tissutale e le risposte infiammatorie. Un’alterata attività della famiglia Schlafen è stata investigata in contesti di disregolazione immunitaria e biologia tumorale, rendendo Slfn3 un bersaglio utile per studi meccanicistici sul controllo della crescita e sulle reti di segnalazione immunitaria.

Il plasmide CRISPR/Cas9 KO Slfn3 (m) è un pool di plasmidi progettato per la distruzione mirata del gene Slfn3 in linee cellulari mouse. Ciascun plasmide co-esprime un singolo RNA guida (sgRNA) unico che prende di mira un sito distinto all'interno del Slfn3 insieme alla nucleasi Cas9 di Streptococcus pyogenes. I plasmidi codificano anche per la GFP, consentendo l'identificazione fluorescente e l'arricchimento delle cellule trasfettate con successo tramite microscopia a fluorescenza o citometria a flusso.

Il design multi-guida aumenta la probabilità di generare inserzioni o delezioni (indels) che interrompono il frame di lettura aperto Slfn3 a seguito della formazione di rotture a doppio filamento mediate da Cas9. Le rotture del DNA introdotte dal sistema CRISPR/Cas9 vengono riparate attraverso vie endogene di giunzione non omologa (NHEJ), che spesso provocano mutazioni con spostamento del frame che annullano l'espressione della proteina Slfn3.

Questo sistema di knockout CRISPR consente la generazione efficiente di modelli cellulari carenti di Slfn3 per lo studio della segnalazione di Slfn3, studi di genomica funzionale, ricerca sulla biologia del cancro e valutazione delle risposte terapeutiche in linee cellulari umane.

Caratteristiche principali

• sgRNA mirati agli esoni Slfn3 critici per la funzione di Slfn3
  Co-espressione di SpCas9 e sgRNA da un singolo plasmide per una somministrazione semplificata
  Reporter GFP per l'identificazione delle cellule trasfettate
  Pool di plasmidi mirati a più siti genomici di Slfn3 per migliorare l'efficienza del knockout
  Compatibile con la somministrazione tramite trasfezione

Varianti di progettazione

CRISPR +/- HDR

• Gli gRNA codificati dal Slfn3 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (m) e dal Slfn3 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (m2) prendono di mira siti distinti all'interno del locus Slfn3. Potrebbe essere disponibile uno o entrambi i design di targeting. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.
  I costrutti donatori HDR codificati dal Slfn3 Plasmide HDR (m) e il plasmide HDR Slfn3 (m2) contengono una cassetta di resistenza alla puromicina e un reporter RFP affiancato da bracci di omologia Slfn3 per supportare la riparazione diretta dall'omologia in siti bersaglio Slfn3 definiti corrispondenti ai disegni CRISPR/Cas9 KO. La disponibilità dei donatori HDR può variare. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.

Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.