SLC6A15 Plasmide KO CRISPR/Cas9 (h): sc-410592

Panoramica

SLC6A15 codifica un trasportatore di amminoacidi neutri sodio-dipendente della famiglia SLC6, che media l’ingresso cellulare di amminoacidi a catena ramificata e di altri amminoacidi neutri, contribuendo all’omeostasi degli amminoacidi e al metabolismo correlato ai neurotrasmettitori. È arricchito nei tessuti neurali e supporta processi quali il nutrient sensing, la funzione sinaptica e l’accoppiamento metabolico attraverso vie legate alla disponibilità di amminoacidi e alle risposte cellulari allo stress. Variazioni o un’espressione alterata di SLC6A15 sono state associate, in studi di ricerca, a fenotipi neuropsichiatrici e alla biologia legata allo stress, riflettendo il suo ruolo nella resilienza metabolica neuronale. In quanto trasportatore di membrana, SLC6A15 rappresenta anche un punto di accesso pratico per studiare la regolazione dei trasportatori, il trafficking e la segnalazione dipendente dal substrato in modelli cellulari umani.

Il plasmide CRISPR/Cas9 KO SLC6A15 (h) è un pool di plasmidi progettato per la distruzione mirata del gene SLC6A15 in linee cellulari human. Ciascun plasmide co-esprime un singolo RNA guida (sgRNA) unico che prende di mira un sito distinto all'interno del SLC6A15 insieme alla nucleasi Cas9 di Streptococcus pyogenes. I plasmidi codificano anche per la GFP, consentendo l'identificazione fluorescente e l'arricchimento delle cellule trasfettate con successo tramite microscopia a fluorescenza o citometria a flusso.

Il design multi-guida aumenta la probabilità di generare inserzioni o delezioni (indels) che interrompono il frame di lettura aperto SLC6A15 a seguito della formazione di rotture a doppio filamento mediate da Cas9. Le rotture del DNA introdotte dal sistema CRISPR/Cas9 vengono riparate attraverso vie endogene di giunzione non omologa (NHEJ), che spesso provocano mutazioni con spostamento del frame che annullano l'espressione della proteina SLC6A15.

Questo sistema di knockout CRISPR consente la generazione efficiente di modelli cellulari carenti di SLC6A15 per lo studio della segnalazione di SLC6A15, studi di genomica funzionale, ricerca sulla biologia del cancro e valutazione delle risposte terapeutiche in linee cellulari umane.

Caratteristiche principali

• sgRNA mirati agli esoni SLC6A15 critici per la funzione di SLC6A15
  Co-espressione di SpCas9 e sgRNA da un singolo plasmide per una somministrazione semplificata
  Reporter GFP per l'identificazione delle cellule trasfettate
  Pool di plasmidi mirati a più siti genomici di SLC6A15 per migliorare l'efficienza del knockout
  Compatibile con la somministrazione tramite trasfezione

Varianti di progettazione

CRISPR +/- HDR

• Gli gRNA codificati dal SLC6A15 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h) e dal SLC6A15 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h2) prendono di mira siti distinti all'interno del locus SLC6A15. Potrebbe essere disponibile uno o entrambi i design di targeting. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.
  I costrutti donatori HDR codificati dal SLC6A15 Plasmide HDR (h) e il plasmide HDR SLC6A15 (h2) contengono una cassetta di resistenza alla puromicina e un reporter RFP affiancato da bracci di omologia SLC6A15 per supportare la riparazione diretta dall'omologia in siti bersaglio SLC6A15 definiti corrispondenti ai disegni CRISPR/Cas9 KO. La disponibilità dei donatori HDR può variare. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.

Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.