SLC25A48 Double Nickaseプラスミド (h): sc-414730-NIC
- 対象生物種: human
- 20 µg のトランスフェクション準備済み、精製したプラスミドDNA、～20回トランスフェクション
- SLC25A48 Double Nickaseプラスミド (h)はペアのプラスミドを含みます。それぞれのプラスミドはD10A変異したCas9 nuclease、及びCRISPR/Cas9 KOの対応よりも高い特異性で遺伝子発現をノックアウトするように設計された標的特異的な20 ntガイドRNA (gRNA)をコードします。
- ペアリングしたガイドRNAは、約20 bpでずらすことにより、ゲノムDNAの特定Cas9媒介のdouble nickingを可能にし、DSBを模造します。
- ペアの1つのプラスミドは選択用のピューロマイシン耐性遺伝子を含みます；ペアのほかの1つのプラスミドは、視覚的にトランスフェクションを確認するGFPマーカーを含みます。
- SLC25A48ダブルニカースプラスミド（h）およびSLC25A48ダブルニカースプラスミド（h2）は、SLC25A48を標的とする異なるペアのgRNA設計をコードしています。いずれか一方、あるいは両方のデザインが利用可能である場合があります
注文情報
| 製品名 | カタログ # | 単位 | 価格 | 数量 | お気に入り | |
SLC25A48 Double Nickaseプラスミド (h) | sc-414730-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
SLC25A48 Double Nickaseプラスミド (h2) | sc-414730-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
SLC25A48は、ミトコンドリア内膜を介した輸送過程に関与するミトコンドリア可溶性キャリア（solute carrier）ファミリーの一員をコードしており、代謝物交換を酸化的リン酸化の効率および細胞のエネルギーバランスと結び付けています。ミトコンドリアの基質利用可能性やレドックス恒常性を形成することで、SLC25A48は、ミトコンドリア機能に依存するストレス応答、代謝リモデリング、細胞状態の転換に影響を及ぼし得る位置にあります。ミトコンドリアキャリアの制御異常は、代謝疾患、神経変性、がんに伴う生体エネルギーの再配線といった文脈で頻繁に研究されており、その点でSLC25A48は機序解明のための有用な結節点となります。SLC25A48の機能解析は、ミトコンドリア輸送がATP産生、活性酸素種（ROS）の制御、アポトーシス感受性を調節する経路とどのように接続しているかを明らかにする助けとなります。
SLC25A48 ダブルニカースプラスミド（h）は、human 細胞株における SLC25A48 座の高特異性編集のために設計された、対となる2つのプラスミドから構成される。各プラスミドは、Cas9 D10Aニカースと、SLC25A48内の対向するDNA鎖を標的とする異なるsgRNAを発現する。対向するDNA鎖上の隣接する部位に誘導されると、2つのニカースはオフセットした一本鎖切断を生成し、これらが組み合わさってずれた二本鎖切断を生じさせる。これにより、両方のガイドによる協調的なオンターゲット活性が必要となる。生じたDNA切断は、細胞内の内在性修復経路、特に非相同末端結合（NHEJ）によって修復され、その結果、SLC25A48の機能を阻害する挿入または欠失が生じる。標的座標における2つのsgRNAの結合を必要とするこの二重ニッキング法は、編集の特異性を高め、標的精度に対するさらなる制御が求められる用途において、CRISPR戦略を補完するものである。
編集された細胞を効率的に同定するために、1つのプラスミドはトランスフェクトされた細胞集団を蛍光可視化するためのGFPをコードし、もう1つのプラスミドは抗生物質選別用のプロマイシン耐性遺伝子を保有しています。これらの機能により、共トランスフェクトされた細胞集団の効率的な濃縮が可能となり、SLC25A48が破壊されたクローンの検証が簡素化されます。
研究用のみ。診断用または治療用ではありません。