Sialyltransferase 7A Double Nickaseプラスミド (h): sc-406723-NIC
- 対象生物種: human
- 20 µg のトランスフェクション準備済み、精製したプラスミドDNA、～20回トランスフェクション
- Sialyltransferase 7A Double Nickaseプラスミド (h)はペアのプラスミドを含みます。それぞれのプラスミドはD10A変異したCas9 nuclease、及びCRISPR/Cas9 KOの対応よりも高い特異性で遺伝子発現をノックアウトするように設計された標的特異的な20 ntガイドRNA (gRNA)をコードします。
- ペアリングしたガイドRNAは、約20 bpでずらすことにより、ゲノムDNAの特定Cas9媒介のdouble nickingを可能にし、DSBを模造します。
- ペアの1つのプラスミドは選択用のピューロマイシン耐性遺伝子を含みます；ペアのほかの1つのプラスミドは、視覚的にトランスフェクションを確認するGFPマーカーを含みます。
- Sialyltransferase 7Aダブルニカースプラスミド（h）およびSialyltransferase 7Aダブルニカースプラスミド（h2）は、ST6GALNAC1を標的とする異なるペアのgRNA設計をコードしています。いずれか一方、あるいは両方のデザインが利用可能である場合があります
注文情報
| 製品名 | カタログ # | 単位 | 価格 | 数量 | お気に入り | |
Sialyltransferase 7A Double Nickaseプラスミド (h) | sc-406723-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Sialyltransferase 7A Double Nickaseプラスミド (h2) | sc-406723-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
ST6GALNAC1 は、シアル酸転移酵素 7A をコードしており、ゴルジ体に局在する糖転移酵素として、GalNAc を含む O-結合型糖鎖にシアル酸を転移し、sialyl-Tn などの α2,6-シアリル化構造を生成します。ムチン型 O-糖鎖修飾を形成・調節することで、糖タンパク質の輸送、細胞—細胞および細胞—マトリックス相互作用、ならびにシアル化および複合糖質生合成経路におけるレクチン介在性シグナル伝達に影響を与えます。ST6GALNAC1 の活性変化は、上皮生物学や免疫認識で観察される異常な糖鎖パターンと関連しています。O-糖鎖のシアリル化の破綻は、接着性や浸潤関連表現型の変化、腫瘍関連の糖鎖エピトープなどと結び付けられており、複数のがんの文脈で報告されています。このことは、グライコミクスに焦点を当てた疾患機序研究における本遺伝子の重要性を裏付けています。
Sialyltransferase 7A ダブルニカースプラスミド（h）は、human 細胞株における ST6GALNAC1 座の高特異性編集のために設計された、対となる2つのプラスミドから構成される。各プラスミドは、Cas9 D10Aニカースと、ST6GALNAC1内の対向するDNA鎖を標的とする異なるsgRNAを発現する。対向するDNA鎖上の隣接する部位に誘導されると、2つのニカースはオフセットした一本鎖切断を生成し、これらが組み合わさってずれた二本鎖切断を生じさせる。これにより、両方のガイドによる協調的なオンターゲット活性が必要となる。生じたDNA切断は、細胞内の内在性修復経路、特に非相同末端結合（NHEJ）によって修復され、その結果、ST6GALNAC1の機能を阻害する挿入または欠失が生じる。標的座標における2つのsgRNAの結合を必要とするこの二重ニッキング法は、編集の特異性を高め、標的精度に対するさらなる制御が求められる用途において、CRISPR戦略を補完するものである。
編集された細胞を効率的に同定するために、1つのプラスミドはトランスフェクトされた細胞集団を蛍光可視化するためのGFPをコードし、もう1つのプラスミドは抗生物質選別用のプロマイシン耐性遺伝子を保有しています。これらの機能により、共トランスフェクトされた細胞集団の効率的な濃縮が可能となり、ST6GALNAC1が破壊されたクローンの検証が簡素化されます。
研究用のみ。診断用または治療用ではありません。