Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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SGTA Plasmide KO CRISPR/Cas9 (m): sc-424626
- Specie Target: mouse
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- SGTA Il plasmide CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) è un pool di plasmidi, ciascuno dei quali codifica la nucleasi Cas9 e un RNA guida (gRNA) specifico per il bersaglio di 20 nt, progettato per la massima efficienza di knockout utilizzando sequenze derivate dalla libreria GeCKO v2
- Le sequenze gRNA indirizzano Cas9 a indurre rotture a doppio filamento (DSB) sito-specifiche nel locus genomico SGTA, con conseguente knockout genico tramite giunzione non omologa (NHEJ)
- I geni di resistenza alla puromicina e RFP sono fiancheggiati da siti LoxP, consentendo la rimozione dei marcatori di selezione tramite la ricombinasi Cre (Cre Vector: sc-418923) dopo aver stabilito linee cellulari knockout stabili
- In seguito alla trasfezione, l'efficienza dll'attivazione genica può essere testata con WB, IF o IHC utilizzando l'anticorpo: SGTA Antibody (6A4): sc-130557
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
SGTA Plasmide KO CRISPR/Cas9 (m) | sc-424626 | 20 µg | $397.00 |
Panoramica
Il gene murino **Sgta** codifica la small glutamine-rich tetratricopeptide repeat-containing protein alpha (SGTA), un co-chaperone citosolico che si lega ai complessi HSP70/HSP90 e riconosce proteine client idrofobiche tramite i suoi domini TPR. SGTA partecipa al controllo qualità delle proteine nascenti e di quelle mal localizzate, coordinando le decisioni di smistamento tra ripiegamento, indirizzamento alle membrane e degradazione proteasomiale. È coinvolta nella gestione delle proteine tail-anchored mediata da BAG6/GET e nella regolazione del turnover dipendente dall’ubiquitina, collegando SGTA alla proteostasi e alle risposte cellulari allo stress. Vie di omeostasi proteica deregolate che coinvolgono SGTA sono rilevanti per studi meccanicistici sulla neurodegenerazione, sull’adattamento allo stress delle cellule tumorali e sui disturbi della biogenesi delle proteine di membrana.
Il plasmide CRISPR/Cas9 KO SGTA (m) è un pool di plasmidi progettato per la distruzione mirata del gene Sgta in linee cellulari mouse. Ciascun plasmide co-esprime un singolo RNA guida (sgRNA) unico che prende di mira un sito distinto all'interno del Sgta insieme alla nucleasi Cas9 di Streptococcus pyogenes. I plasmidi codificano anche per la GFP, consentendo l'identificazione fluorescente e l'arricchimento delle cellule trasfettate con successo tramite microscopia a fluorescenza o citometria a flusso.
Il design multi-guida aumenta la probabilità di generare inserzioni o delezioni (indels) che interrompono il frame di lettura aperto Sgta a seguito della formazione di rotture a doppio filamento mediate da Cas9. Le rotture del DNA introdotte dal sistema CRISPR/Cas9 vengono riparate attraverso vie endogene di giunzione non omologa (NHEJ), che spesso provocano mutazioni con spostamento del frame che annullano l'espressione della proteina SGTA.
Questo sistema di knockout CRISPR consente la generazione efficiente di modelli cellulari carenti di Sgta per lo studio della segnalazione di SGTA, studi di genomica funzionale, ricerca sulla biologia del cancro e valutazione delle risposte terapeutiche in linee cellulari umane.
Caratteristiche principali
- sgRNA mirati agli esoni Sgta critici per la funzione di SGTA
Co-espressione di SpCas9 e sgRNA da un singolo plasmide per una somministrazione semplificata
Reporter GFP per l'identificazione delle cellule trasfettate
Pool di plasmidi mirati a più siti genomici di Sgta per migliorare l'efficienza del knockout
Compatibile con la somministrazione tramite trasfezione
Varianti di progettazione
CRISPR +/- HDR
- Gli gRNA codificati dal SGTA CRISPR/Cas9 KO Plasmid (m) e dal SGTA CRISPR/Cas9 KO Plasmid (m2) prendono di mira siti distinti all'interno del locus Sgta. Potrebbe essere disponibile uno o entrambi i design di targeting. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.
I costrutti donatori HDR codificati dal SGTA Plasmide HDR (m) e il plasmide HDR SGTA (m2) contengono una cassetta di resistenza alla puromicina e un reporter RFP affiancato da bracci di omologia Sgta per supportare la riparazione diretta dall'omologia in siti bersaglio Sgta definiti corrispondenti ai disegni CRISPR/Cas9 KO. La disponibilità dei donatori HDR può variare. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.