SELENBP1 CRISPR Activationプラスミド (h): sc-403679-ACT

SELENBP1（セレン結合タンパク質1）は、細胞質に局在するセレン関連タンパク質で、細胞内のレドックス恒常性や代謝制御に関与すると考えられています。解毒関連プロセスへの関与や、タンパク質フォールディングならびに酸化ストレス応答の調節における役割も報告されています。SELENBP1の発現は、複数の腫瘍タイプや炎症性の状況でしばしば変動するため、分化状態の変化、細胞ストレスへの適応、代謝の再配線（リプログラミング）を反映する分子指標として有用です。SELENBP1は、活性酸素種（ROS）の処理、外来性化合物（ゼノバイオティクス）代謝、増殖や遊走といった表現型に影響する細胞状態遷移と交差する経路に関連づけられています。その結果、SELENBP1は、がん生物学、組織リモデリング、ストレス応答性シグナル伝達の機序モデルにおいて、機能的マーカーおよび調節因子として一般的に研究されています。

SELENBP1 CRISPR活性化プラスミド（h）は、基盤となるDNA配列を変更することなく、内因性SELENBP1の発現を標的化し、非破壊的にアップレギュレートするアプローチを提供します。

SELENBP1 CRISPR 活性化プラスミド (h) は、ヒト細胞株における SELENBP1 遺伝子座の高効率かつ部位特異的な転写アップレギュレーションのために設計された、3 つのプラスミドからなる相乗的活性化メディエーター (SAM) システムです。このシステムは、DNA結合能を維持しつつヌクレアーゼ活性を失わせる2つの不活性化変異（D10AおよびN863A）を有する、触媒活性のないCas9（dCas9）を中核としています。このdCas9は、強力な転写活性化因子であるVP64と融合しており、選別用のブラスティシジン耐性遺伝子と共に共発現します。2番目のプラスミドは、dCas9-VP64と協調して機能する二次活性化複合体であるMS2-p65-HSF1融合タンパク質をコードしており、ヒグロマイシン耐性遺伝子と共に発現する。3番目のプラスミドは、標的特異的な20塩基対のsgRNAをコードしており、これはMS2-p65-HSF1複合体を活性化部位に誘導する2つのMS2 RNAアプタマーと融合しており、さらにピューロマイシン耐性遺伝子が付随している。これら3つのプラスミドは、システム構成要素すべてが均等に発現するよう、質量比1:1:1で導入される。

標的遺伝子座に集合すると、SAM複合体はSELENBP1転写開始点の上流約200 bpの領域に結合し、そこでVP64、p65、およびHSF1が協調して転写装置を動員し、内因性SELENBP1の発現上昇を促進する。ヌクレアーゼ活性を持つCas9とは異なり、 dCas9は二本鎖切断を導入したりゲノム配列を改変したりしないため、天然のSELENBP1遺伝子座が保持され、内因性遺伝子座におけるSELENBP1依存性の転写応答の研究が可能となります。これにより、機能解析、標的遺伝子の同定、およびSELENBP1発現が沈黙または低下した腫瘍細胞におけるSELENBP1経路の回復のモデル化を行う上で、貴重なツールとなります。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。