Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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SAP 155 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-402925-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- SAP 155O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase SAP 155 (h) e o Plasmídeo Double Nickase SAP 155 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para SF3B1. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:SAP 155 Anticorpo (B-3): sc-514655
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
SAP 155 Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-402925-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
SAP 155 Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-402925-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
SF3B1 codifica a SAP 155, um componente central essencial do subcomplexo SF3b dentro do snRNP U2, que ajuda a definir o ponto de ramificação e o sítio de splicing 3′ durante o splicing do pré-mRNA. Por meio do seu papel na montagem do spliceossomo e na escolha dos sítios de splicing, a SAP 155 influencia a diversidade de isoformas de transcritos e conecta o processamento de RNA ao controle do ciclo celular, às respostas a danos no DNA e à proteostase. A desregulação do splicing dependente de SF3B1 tem sido associada a um uso aberrante generalizado de éxons e a programas de expressão gênica alterados em múltiplos cânceres e neoplasias hematológicas, bem como em outros distúrbios nos quais a fidelidade do spliceossomo está comprometida. Como resultado, SF3B1/SAP 155 é frequentemente estudada para relacionar a perturbação de fatores de splicing com mudanças a jusante em vias de sinalização e assinaturas de splicing em RNA-seq.
SAP 155 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus SF3B1 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de SF3B1. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função SF3B1. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com SF3B1 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.