Sall4 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-401033-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- Sall4O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase Sall4 (h) e o Plasmídeo Double Nickase Sall4 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para SALL4. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:Sall4 Anticorpo (G-3): sc-166033
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
Sall4 Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-401033-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Sall4 Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-401033-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
SALL4 codifica a Sall4, um fator de transcrição do tipo dedo de zinco C2H2 que ajuda a manter a pluripotência e regula programas de expressão gênica do desenvolvimento inicial, incluindo redes que controlam a autorrenovação, o comprometimento de linhagem e o estado da cromatina. Sall4 coordena circuitos transcricionais com fatores como OCT4 e NANOG e interage com reguladores epigenéticos para moldar a atividade de enhancers e promotores durante a embriogênese. Em contextos somáticos, a expressão desregulada de SALL4 está associada a alterações na diferenciação e na sinalização proliferativa e já foi relatada em múltiplas neoplasias, tornando-o um nó útil para estudar a reprogramação transcricional oncogênica. A perturbação genética de SALL4 dá suporte a investigações mecanísticas da biologia de células-tronco, transições de destino celular e redes regulatórias gênicas conduzidas por fatores de transcrição.
Sall4 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus SALL4 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de SALL4. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função SALL4. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com SALL4 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.