Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
RUNX2 Plasmídeo duplo de Nickase (m): sc-419482-NIC
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- RUNX2O plasmídeo de dupla Nickase (m) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase RUNX2 (m) e o Plasmídeo Double Nickase RUNX2 (m2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para Runx2. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:RUNX2 Anticorpo (F-2): sc-390351
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
RUNX2 Plasmídeo duplo de Nickase (m) | sc-419482-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
RUNX2 Plasmídeo duplo de Nickase (m2) | sc-419482-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Runx2 codifica o fator de transcrição RUNX2, um regulador mestre do comprometimento da linhagem de osteoblastos e da morfogênese esquelética em camundongos. O RUNX2 coordena a expressão de genes da matriz óssea e integra sinais das vias BMP/TGF-β, da atividade Wnt/β-catenina e de vias MAPK para controlar a diferenciação osteogênica, a deposição de matriz extracelular e a mineralização. Além do desenvolvimento, a atividade alterada de RUNX2 está associada à remodelação óssea desregulada e tem sido implicada na calcificação patológica e em programas de células tumorais envolvendo transições do tipo EMT e metástase com tropismo ósseo. Essas características fazem de Runx2 um alvo amplamente utilizado para estudar especificação de linhagem, mecanotransdução no osso e remodelação de redes transcricionais em contextos relevantes para doenças.
RUNX2 O Plasmídeo de Nickase Dupla (m) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus Runx2 em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de Runx2. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função Runx2. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com Runx2 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.