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Rtn-3慢病毒激活颗粒(h) | sc-404072-LAC | 200 µl | $455.00 |
RTN3 编码网织蛋白-3(reticulon-3,Rtn-3),这是一种内质网(ER)膜蛋白,有助于塑造管状内质网的结构,并参与内质网—高尔基体(ER–Golgi)运输动态。Rtn-3 与蛋白质稳态以及细胞对错误折叠蛋白的应答有关,因此与内质网应激信号及其影响神经元稳态的相关通路相联系。在神经系统中,RTN3 与淀粉样前体蛋白(APP)加工和神经突起生物学有关,为研究神经退行性表型背后的机制提供支持。RTN3 表达量或定位的改变也与膜运输和突触功能紊乱相关,使其成为在人源细胞模型中解析内质网网络调控的有用靶点。
Rtn-3 慢病毒激活颗粒(h)通过将完整的协同激活介导体(SAM)转录激活系统包装到可直接转导的高滴度慢病毒颗粒中,满足了这一需求,从而能够在更广泛的人类细胞类型中高效上调 RTN3 表达。
Rtn-3 慢病毒激活颗粒(h)通过慢病毒转导递送协同激活介导体(SAM)系统的所有功能组分。该系统包含三种共同转导至靶细胞的颗粒制剂:一种编码与VP64转激活域融合的无催化活性的dCas9(D10A和N863A突变),并携带布拉西定抗性基因; 一种编码MS2-p65-HSF1融合蛋白并携带潮霉素抗性基因的制剂;以及一种编码靶标特异性20 nt sgRNA(与两个MS2 RNA适配体融合)并携带嘌呤霉素抗性基因的制剂。经过慢病毒转导和表达盒的基因组整合后,SAM组分得以稳定表达,并在RTN3转录起始位点上游的近端启动子区域内的靶位点组装。在此处,VP64、p65和HSF1协同作用,招募内源性转录 machinery,从而驱动内源性Rtn-3表达的持续上调。使用无核酸酶活性的 dCas9 可避免引入双链 DNA 断裂,并保留原生的 RTN3 基因组位点和调控架构。
慢病毒载体具有多项实用优势:稳定的基因组整合支持细胞分裂过程中的可遗传激活;高滴度颗粒制剂免去了内部病毒生产的需要;且与原代细胞、非增殖细胞及转染抗性细胞类型的兼容性,扩大了实验的可及性。可通过嘌呤霉素、潮霉素和布拉西定进行三重抗生素筛选,以确认并富集成功的转导。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。