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RORγ双切口酶质粒(h) | sc-400912-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
RORγ双切口酶质粒(h2) | sc-400912-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
RORC 编码核受体 RORγ,这是一种配体调控的转录因子,可结合 ROR 反应元件,从而调控参与免疫分化与代谢的基因程序。RORγ 是 Th17 细胞谱系承诺及 IL-17 家族细胞因子表达的核心调控因子,它整合细胞因子网络与核受体信号传导的输入,塑造炎症相关的转录状态。除在适应性免疫中的作用外,RORγ 还参与淋巴器官发生,并在造血细胞中发挥更广泛的转录调控功能。RORC/RORγ 活性失调与慢性炎症、自身免疫相关通路以及肿瘤免疫微环境生物学有关,因此常被作为研究免疫信号机制的重点靶点。
RORγ 双切酶质粒(h)由一对匹配的质粒组成,专为在 human 细胞系中对 RORC 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对RORC内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏RORC的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了RORC基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。