Ron β Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-400489-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- Ron βO plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase Ron β (h) e o Plasmídeo Double Nickase Ron β (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para MST1R. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:Ron α Anticorpo (C-5): sc-393523
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
Ron β Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-400489-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Ron β Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-400489-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
MST1R codifica o receptor tirosina-quinase RON (também conhecido como receptor 1 estimulador de macrófagos), um membro da família MET que transmite sinais a partir da proteína estimuladora de macrófagos (MSP). Após a ativação, o RON aciona vias a jusante como PI3K–AKT, RAS–MAPK e sinalização via STAT para regular a sobrevivência e a migração de células epiteliais e programas associados ao reparo de feridas, podendo também modular a polarização de macrófagos e as respostas inflamatórias. Alterações na sinalização MST1R/RON têm sido associadas a fenótipos desregulados de motilidade e invasão celular e a mudanças no crosstalk entre tumor e microambiente em múltiplos contextos de câncer. A isoforma beta de Ron fornece uma variante biologicamente relevante para dissecar saídas de sinalização específicas de isoforma e o crosstalk entre receptores dentro de redes da família MET.
Ron β O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus MST1R em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de MST1R. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função MST1R. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com MST1R interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.