RNF149 Plasmídeo duplo de Nickase (m): sc-426694-NIC
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- RNF149O plasmídeo de dupla Nickase (m) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase RNF149 (m) e o Plasmídeo Double Nickase RNF149 (m2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para Rnf149. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
RNF149 Plasmídeo duplo de Nickase (m) | sc-426694-NIC | 20 µg | $410.00 |
O gene Rnf149 de camundongo codifica a RNF149, uma ligase E3 de ubiquitina do tipo dedo RING que contribui para a degradação de proteínas dependente de ubiquitina e para a regulação da proteostase celular. Como parte do controle do sistema ubiquitina–proteassoma, a RNF149 é relevante para vias que governam o controle de qualidade proteica, a amplitude de sinalização e respostas adaptativas ao estresse que moldam a sobrevivência celular e a homeostase. Programas de ubiquitinação alterados estão amplamente implicados em fenótipos associados a doenças, incluindo desregulação do controle de crescimento e estresse proteotóxico ligado à neurodegeneração, tornando a RNF149 um ponto útil para estudos mecanísticos. A investigação funcional da RNF149 apoia pesquisas sobre como ligases E3 ajustam a estabilidade de substratos e os desfechos de vias a jusante em células de mamíferos.
RNF149 O Plasmídeo de Nickase Dupla (m) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus Rnf149 em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de Rnf149. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função Rnf149. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com Rnf149 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.