RNF123 Plasmídeo duplo de Nickase (m): sc-429979-NIC
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- RNF123O plasmídeo de dupla Nickase (m) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase RNF123 (m) e o Plasmídeo Double Nickase RNF123 (m2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para Rnf123. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
RNF123 Plasmídeo duplo de Nickase (m) | sc-429979-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
RNF123 Plasmídeo duplo de Nickase (m2) | sc-429979-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Rnf123 codifica a ligase E3 de ubiquitina RNF123 (também conhecida como KPC1), uma proteína do tipo RING finger que contribui para a proteostase dependente de ubiquitina ao catalisar a ubiquitinação de substratos e direcionar proteínas ao proteassoma 26S. A RNF123 tem sido associada à regulação da progressão do ciclo celular, incluindo a renovação/degradação de reguladores do ciclo celular como CDKN1B/p27, e pode influenciar checkpoints, proliferação e respostas ao estresse celular por meio de vias ubiquitina–proteassoma. Em sistemas murinos, a perturbação da função de RNF123 é, portanto, relevante para dissecar redes de sinalização por ubiquitina que se intersectam com controle de crescimento, diferenciação e homeostase tecidual. Alterações na ubiquitinação e na degradação mediada pelo proteassoma são amplamente implicadas em pesquisas em oncologia e neurobiologia, tornando a RNF123 um nó útil para estudos mecanísticos de desequilíbrios de proteostase e sinalização associados a doenças.
RNF123 O Plasmídeo de Nickase Dupla (m) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus Rnf123 em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de Rnf123. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função Rnf123. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com Rnf123 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.