Plasmide Double Nickase (m) Relaxin 3: sc-431778-NIC
- Espèces cibles: mouse
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (m) Relaxin 3 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide Relaxin 3 Double Nickase (m) et le plasmide Relaxin 3 Double Nickase (m2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant Rln3. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (m) Relaxin 3 | sc-431778-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (m2) Relaxin 3 | sc-431778-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Le gène murin **Rln3** code la **relaxine 3**, un neuropeptide sécrété de la superfamille insuline/relaxine qui signale principalement via le **GPCR RXFP3** (et, selon le contexte, **RXFP1/RXFP4**) afin de réguler l’excitabilité neuronale et l’intégration neuroendocrinienne. La relaxine 3 est enrichie dans des circuits du tronc cérébral et de l’hypothalamus, et influence le comportement alimentaire, l’éveil, la réactivité au stress et la sortie autonome via des voies de GPCR couplées à **l’AMPc/PKA** et des programmes transcriptionnels en aval. Des altérations de la signalisation de la relaxine 3 ont été étudiées dans des modèles de dérégulation métabolique, de phénotypes liés à l’anxiété et au stress, ainsi que de perturbations du cycle veille–sommeil, où la modulation à l’échelle des circuits affecte l’équilibre énergétique et l’état comportemental. Ainsi, **Rln3** constitue un point d’entrée moléculaire utile pour étudier la signalisation des peptides neuromodulateurs et le fonctionnement des réseaux hypothalamiques dans des systèmes murins.
Relaxin 3 Le plasmide double nickase (m) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus Rln3 dans les lignées cellulaires mouse. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de Rln3. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de Rln3. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de Rln3.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.