Rad51D Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-408085-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- Rad51DO plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase Rad51D (h) e o Plasmídeo Double Nickase Rad51D (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para RAD51D. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:Rad51D Anticorpo (C-1): sc-398819
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
Rad51D Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-408085-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Rad51D Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-408085-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
RAD51D codifica a proteína Rad51D, um parálogo de RAD51 que atua no complexo BCDX2 para promover a recombinação homóloga (RH) e o reinício de forquilhas de replicação estagnadas. A Rad51D auxilia no reparo de quebras de dupla fita do DNA, contribui para a estabilidade do genoma e interage com a rede de anemia de Fanconi/BRCA e com a sinalização de checkpoints durante as fases S e G2. Defeitos em RAD51D comprometem a capacidade de RH, aumentam a instabilidade cromossômica e estão associados à predisposição hereditária ao câncer e à tumorigênese em múltiplos contextos teciduais. Por isso, RAD51D é amplamente estudado em vias de resposta a dano no DNA, em modelos de estresse replicativo e em análises de estrutura e função de complexos mediadores de RH.
Rad51D O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus RAD51D em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de RAD51D. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função RAD51D. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com RAD51D interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.