Rab11-FIP1 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-407521-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- Rab11-FIP1O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase Rab11-FIP1 (h) e o Plasmídeo Double Nickase Rab11-FIP1 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para RAB11FIP1. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:Rab11-FIP1 Anticorpo (3A12H9D2): sc-517228
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
Rab11-FIP1 Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-407521-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Rab11-FIP1 Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-407521-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
RAB11FIP1 codifica a Rab11-FIP1, um efetor da família Rab11 que coordena o tráfego de endossomos de reciclagem dependente de Rab11 e a reciclagem de membrana para a membrana plasmática. Por meio de interações com pequenas GTPases e proteínas motoras/adaptadoras, Rab11-FIP1 ajuda a regular a reciclagem de receptores, o transporte polarizado, a citocinese e a manutenção da arquitetura de células epiteliais. Esses processos influenciam as respostas de sinalização e a motilidade celular ao controlar a localização e a renovação de proteínas de membrana, incluindo receptores e moléculas de adesão. A desregulação da reciclagem endossomal e de programas de tráfego associados à Rab11-FIP1 tem sido relacionada a alterações no comportamento proliferativo e migratório na biologia do câncer e a defeitos mais amplos em vias de transporte vesicular relevantes para a neurobiologia e a regulação metabólica.
Rab11-FIP1 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus RAB11FIP1 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de RAB11FIP1. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função RAB11FIP1. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com RAB11FIP1 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.