QP-C CRISPR/Cas9 KOプラスミド (m): sc-423624

概要

Uqcrq は、ミトコンドリア呼吸鎖複合体III（ユビキノール‐シトクロムc還元酵素）の小型アクセサリーサブユニットである QP-C をコードしており、ミトコンドリア内膜におけるシトクロム bc1 複合体の組み立てと安定性を支えます。ユビキノールからシトクロムcへの電子伝達に影響を与えることで、QP-C は酸化的リン酸化、ミトコンドリア膜電位の維持、ならびに細胞内のレドックス恒常性に寄与します。複合体IIIの構成要素が破綻するとATP産生が低下し、ミトコンドリア由来の活性酸素種（ROS）が増加する可能性があり、Uqcrq 依存的な過程がバイオエネルギー・ストレス応答やアポトーシスシグナル伝達と関連することが示唆されます。そのためマウス系では、Uqcrq は代謝活性の高い組織におけるミトコンドリア機能不全の機序研究や、神経筋・心代謝系の表現型に関与する経路のモデル化に有用です。

QP-C CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）は、mouse細胞株におけるUqcrq遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、Uqcrq内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、Uqcrqのオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、QP-Cタンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、QP-Cシグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、Uqcrq欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• QP-Cの機能に不可欠なUqcrqエクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、Uqcrqゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• QP-C CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）およびQP-C CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m2）によってコードされるgRNAは、Uqcrq遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  QP-C HDRプラスミド（m）および QP-C HDRプラスミド（m2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはUqcrqホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のUqcrq標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。