Progesterone Receptor Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-400198-NIC

PGR codifica o receptor humano de progesterona, um fator de transcrição nuclear ativado por ligante que regula programas gênicos que controlam o desenvolvimento de tecidos reprodutivos, a decidualização e a proliferação e diferenciação de células responsivas a hormônios. Após a ligação da progesterona, o PGR interage com elementos de resposta hormonal e correaguladores para modular a cromatina e a transcrição, além de se integrar às vias MAPK/ERK e PI3K/AKT e de estabelecer crosstalk com a sinalização do receptor de estrogênio, moldando respostas do ciclo celular e inflamatórias. Alterações na expressão do PGR, no equilíbrio entre isoformas ou na saída de sinalização estão implicadas na biologia dependente de hormônios e são frequentemente estudadas em contextos como câncer de mama e endométrio, endometriose, miomas uterinos e infertilidade. Essas características fazem do PGR um nó central para investigar redes transcricionais de receptores esteroides e a regulação endócrina em modelos de células humanas.

Progesterone Receptor O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus PGR em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de PGR. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função PGR. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.

Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com PGR interrompido.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.