Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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Plasmide Double Nickase (h) PRL-R: sc-400814-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) PRL-R correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide PRL-R Double Nickase (h) et le plasmide PRL-R Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant PRLR. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: PRL-R Antibody (D-7): sc-377098
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) PRL-R | sc-400814-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) PRL-R | sc-400814-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
PRLR code le récepteur humain de la prolactine (PRL‑R), un récepteur de cytokines de classe I qui médie les réponses à la prolactine dans les tissus épithéliaux, immunitaires et endocriniens. L’activation du récepteur dépendante du ligand stimule la signalisation JAK2/STAT5 et mobilise les cascades PI3K–AKT et MAPK afin de réguler des programmes transcriptionnels contrôlant la différenciation, la survie et la prolifération. L’activité de PRL‑R contribue au développement de la glande mammaire et à la biologie de la lactation, et elle est fréquemment étudiée dans des contextes hormonodépendants. Des altérations de l’expression ou de la signalisation de PRLR ont été associées à une dérégulation de la signalisation endocrine et à des phénotypes prolifératifs pertinents pour la recherche en oncologie et en métabolisme.
PRL-R Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus PRLR dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de PRLR. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de PRLR. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de PRLR.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.