PRDM14 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-404426-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- PRDM14O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase PRDM14 (h) e o Plasmídeo Double Nickase PRDM14 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para PRDM14. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:PRDM14 Anticorpo (F-10): sc-518186
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
PRDM14 Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-404426-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
PRDM14 Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-404426-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
PRDM14 codifica um regulador transcricional contendo o domínio PR/SET que ajuda a estabelecer e manter programas de pluripotência e a competência das células germinativas por meio de controle epigenético e transcricional. Em células humanas, PRDM14 modula o estado da cromatina e as paisagens de metilação do DNA, influenciando o comprometimento de linhagem, a eficiência de reprogramação e redes regulatórias de genes do desenvolvimento. A expressão aberrante de PRDM14 e a desregulação do circuito de pluripotência têm sido associadas a estados de diferenciação alterados e a programas transcricionais oncogênicos em múltiplos contextos tumorais. Como um nó em vias associadas à “stemness”, PRDM14 é frequentemente investigado para dissecar mecanismos de regulação epigenética, decisões de destino celular e a estabilidade de redes de fatores de transcrição.
PRDM14 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus PRDM14 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de PRDM14. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função PRDM14. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com PRDM14 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.