PPP1R12C慢病毒激活颗粒(h): sc-412332-LAC

PPP1R12C 编码肌球蛋白磷酸酶靶向亚基 3（MYPT3），它是蛋白磷酸酶 1（PP1）的调控组分，可帮助将 PP1 的催化活性定向作用于细胞骨架底物。通过调控肌球蛋白轻链及相关肌动-肌球蛋白调节因子的磷酸化状态，PPP1R12C 影响细胞收缩性、黏附动态与细胞运动，并整合来自 RhoA/ROCK 及其他激酶通路的信号输入。PP1 靶向改变以及肌球蛋白磷酸酶功能异常会干扰细胞骨架重塑与力学信号转导；这些过程常与肿瘤细胞侵袭、纤维化相关重塑以及血管平滑肌功能障碍有关。因此，PPP1R12C 的表达及其受磷酸化依赖的调控，对研究应力纤维组织、细胞形态控制以及调节收缩表型的信号串扰具有重要意义。

PPP1R12C 慢病毒激活颗粒（h）通过将完整的协同激活介导体（SAM）转录激活系统包装到可直接转导的高滴度慢病毒颗粒中，满足了这一需求，从而能够在更广泛的人类细胞类型中高效上调 PPP1R12C 表达。

PPP1R12C 慢病毒激活颗粒（h）通过慢病毒转导递送协同激活介导体（SAM）系统的所有功能组分。该系统包含三种共同转导至靶细胞的颗粒制剂：一种编码与VP64转激活域融合的无催化活性的dCas9（D10A和N863A突变），并携带布拉西定抗性基因； 一种编码MS2-p65-HSF1融合蛋白并携带潮霉素抗性基因的制剂；以及一种编码靶标特异性20 nt sgRNA（与两个MS2 RNA适配体融合）并携带嘌呤霉素抗性基因的制剂。经过慢病毒转导和表达盒的基因组整合后，SAM组分得以稳定表达，并在PPP1R12C转录起始位点上游的近端启动子区域内的靶位点组装。在此处，VP64、p65和HSF1协同作用，招募内源性转录 machinery，从而驱动内源性PPP1R12C表达的持续上调。使用无核酸酶活性的 dCas9 可避免引入双链 DNA 断裂，并保留原生的 PPP1R12C 基因组位点和调控架构。

慢病毒载体具有多项实用优势：稳定的基因组整合支持细胞分裂过程中的可遗传激活；高滴度颗粒制剂免去了内部病毒生产的需要；且与原代细胞、非增殖细胞及转染抗性细胞类型的兼容性，扩大了实验的可及性。可通过嘌呤霉素、潮霉素和布拉西定进行三重抗生素筛选，以确认并富集成功的转导。

仅供研究使用。不用于诊断或治疗。