POT1 Lentiviral Activation Particles (h): sc-403275-LAC

ヒトPOT1（protection of telomeres 1）は、一本鎖の3′テロメアオーバーハングに結合するシェルテリン複合体の中核構成因子をコードし、異常なATR依存性DNA損傷シグナル伝達を抑制するとともに、テロメラーゼのアクセスを調節します。POT1は、テロメアキャッピング、末端プロセシング、テロメア反復配列を通過する複製フォークの進行を協調的に制御することで、染色体末端の完全性とゲノム安定性の維持に寄与します。POT1機能の破綻は、テロメア機能不全、テロメア長恒常性の変化、染色体不安定性の増大と関連しており、腫瘍素因や血液・皮膚の悪性腫瘍に関連する生物学の研究において重要な過程です。そのためPOT1は、DNA損傷応答経路、反復DNAにおける複製ストレス、ならびにテロメア維持を制御する機構を解析するための重要なノードとして広く用いられています。

POT1 レンチウイルス活性化粒子（h）は、完全な相乗的活性化メディエーター（SAM）転写活性化システムを、トランスダクション可能な高力価レンチウイルス粒子に封入することでこのニーズに対応し、より広範なヒト細胞タイプにおいて効率的なPOT1の発現上昇を可能にします。

POT1 レンチウイルス活性化粒子（h）は、レンチウイルス媒介を介して、シナジー活性化メディエーター（SAM）システムのすべての機能的構成要素を届ける。このシステムは、標的細胞へ共導入される3種類の粒子製剤で構成されています。1つは、VP64転写活性化ドメインとブラスティシジン耐性遺伝子を融合させた、触媒活性のないdCas9（D10AおよびN863A変異）をコードするものです。ヒグロマイシン耐性遺伝子を有するMS2-p65-HSF1融合タンパク質をコードするもの；および、2つのMS2 RNAアプタマーと融合した標的特異的20塩基対sgRNAをコードし、プロマイシン耐性遺伝子を有するもの。レンチウイルスによる導入および発現カセットのゲノムへの組み込み後、SAM構成要素は安定して発現し、POT1転写開始点の上流にある近位プロモーター領域内の標的座に集合する。そこでは、VP64、p65、およびHSF1が協調して作用し、内因性の転写機構を動員して、内因性POT1の発現を持続的に上向きに調節する。ヌクレアーゼ不活性型dCas9を使用することで、二本鎖DNA切断の導入を回避し、天然のPOT1ゲノム座および制御機構を維持します。

レンチウイルス形式には、いくつかの実用的な利点があります。安定したゲノム組み込みにより、細胞分裂を経ても遺伝的に継承される活性化がサポートされます。高力価の粒子調製により、施設内でのウイルス生産の必要性がなくなります。また、初代培養細胞、非増殖性細胞、およびトランスフェクション抵抗性細胞との互換性により、実験の適用範囲が広がります。成功したトランスダクションは、プロマイシン、ハイグロマイシン、ブラスティシジンを用いた三重抗生物質選別により確認および選別が可能である。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。