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PMS2双切口酶质粒(m) | sc-422324-NIC | 20 µg | $410.00 |
小鼠 Pms2 基因编码 PMS2 蛋白,它是与 MLH1 组成 MutLα 复合体的核心成分,负责在复制错误发生后协调 DNA 错配修复。PMS2 具有内切核酸酶活性,有助于启动切除与再合成步骤,并通过与 PCNA、EXO1 及 DNA 聚合酶的相互作用,将错配识别与下游修复过程衔接起来。通过这些作用,PMS2 促进基因组稳定性、抑制微卫星不稳定性,并维持细胞周期的保真性。PMS2 功能受损与突变率升高相关,并被认为参与癌症易感综合征及更广泛的 DNA 修复相关疾病机制,因此成为在小鼠模型中研究诱变过程与检查点反应的重要靶点。
PMS2 双切酶质粒(m)由一对匹配的质粒组成,专为在 mouse 细胞系中对 Pms2 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对Pms2内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏Pms2的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了Pms2基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。