PMCA2 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-403416-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- PMCA2O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase PMCA2 (h) e o Plasmídeo Double Nickase PMCA2 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para ATP2B2. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
PMCA2 Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-403416-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
PMCA2 Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-403416-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
ATP2B2 codifica a ATPase 2 transportadora de Ca2+ da membrana plasmática (PMCA2), uma ATPase do tipo P de alta afinidade que extrude Ca2+ citosólico para manter a homeostase do cálcio após eventos de sinalização. Ao moldar a amplitude e a duração de vias dependentes de Ca2+, a PMCA2 influencia processos como transmissão sináptica, sinalização sensorial e regulação gênica dependente de atividade, além de contribuir para o acoplamento entre o influxo de cálcio e efetores a jusante. A atividade da PMCA2 integra-se à regulação por calmodulina e a redes mais amplas de transporte iônico e potencial de membrana que coordenam a dinâmica intracelular de Ca2+. Alterações genéticas e de expressão em ATP2B2 têm sido associadas a distúrbios que afetam a função auditiva e neural, reforçando sua relevância como alvo para estudos mecanísticos da fisiologia dependente de cálcio.
PMCA2 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus ATP2B2 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de ATP2B2. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função ATP2B2. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com ATP2B2 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.