Plasmide Double Nickase (h) PHF8: sc-407306-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) PHF8 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide PHF8 Double Nickase (h) et le plasmide PHF8 Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant PHF8. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) PHF8 | sc-407306-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) PHF8 | sc-407306-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
PHF8 code une déméthylase des lysines des histones contenant un domaine JmjC, qui élimine préférentiellement des marques répressives telles que H3K9me2/1 et peut également agir sur les états de méthylation de H4K20, reliant ainsi le remodelage de la chromatine au contrôle transcriptionnel. Grâce à la reconnaissance de la méthylation de H3K4 médiée par son doigt PHD, PHF8 est recrutée sur des promoteurs actifs, où elle module des programmes d’expression génique dépendants de l’ARN polymérase II. PHF8 participe à la régulation épigénétique de la progression du cycle cellulaire, de la différenciation neuronale et de la dynamique de la chromatine associée aux dommages de l’ADN. La dérégulation ou les mutations de PHF8 ont été associées à des phénotypes neurodéveloppementaux et à des réseaux transcriptionnels pertinents en cancérologie, ce qui en fait une cible utile pour l’étude de la régulation génique dépendante de la chromatine.
PHF8 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus PHF8 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de PHF8. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de PHF8. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de PHF8.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.