Peroxin 26 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-408486-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- Peroxin 26O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase Peroxin 26 (h) e o Plasmídeo Double Nickase Peroxin 26 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para PEX26. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:Peroxin 26 Anticorpo (A-9): sc-376817
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
Peroxin 26 Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-408486-NIC | 20 µg | $410.00 |
O gene humano **PEX26** codifica a **peroxina 26**, uma proteína de membrana peroxissomal necessária para a biogénese dos peroxissomas e para a manutenção da importação de proteínas da matriz. O **PEX26** atua na maquinaria de importação de proteínas peroxissomais ao ancorar, na membrana, o complexo de reciclagem de AAA ATPases (**PEX1–PEX6**), permitindo a renovação do recetor **PEX5** e sustentando a importação de cargas **PTS1/PTS2**. Por meio dessa função, o **PEX26** dá suporte a vias metabólicas lipídicas centradas nos peroxissomas, incluindo a β-oxidação de ácidos gordos de cadeia muito longa, a biossíntese de fosfolípidos etéreos (plasmalogénios) e a homeostase de espécies reativas de oxigénio. Variantes patogénicas de **PEX26** estão associadas a distúrbios da biogénese peroxissomal dentro do espectro de **Zellweger**, tornando o **PEX26** um alvo importante para estudos mecanísticos de disfunção de organelos e de fenótipos de doença metabólica.
Peroxin 26 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus PEX26 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de PEX26. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função PEX26. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com PEX26 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.