Per1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (h): sc-401260

概要

PER1 は Period 1 タンパク質をコードしており、24 時間周期のリズミックな遺伝子発現を制御する転写—翻訳フィードバックループに関与する分子概日時計の中核構成要素です。PER1 は他の時計制御因子と相互作用して CLOCK/ARNTL（BMAL1）駆動性の転写を調節し、概日時刻の制御を細胞周期制御、DNA 損傷応答、代謝、ホルモンシグナル伝達と結び付けます。これらのネットワークを通じて、PER1 は細胞ストレス経路の時間的協調や、ミトコンドリアおよびレドックス恒常性にも影響を及ぼします。PER1 の発現やリズム性の破綻は、睡眠—覚醒生理の変化と関連しており、がん生物学、代謝性疾患、神経精神疾患の機序に関する研究でも報告されています。

Per1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）は、human細胞株におけるPER1遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、PER1内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、PER1のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、Per1タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、Per1シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、PER1欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• Per1の機能に不可欠なPER1エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、PER1ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• Per1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）およびPer1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h2）によってコードされるgRNAは、PER1遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  Per1 HDRプラスミド（h）および Per1 HDRプラスミド（h2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはPER1ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のPER1標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。