Pegasus Plasmídeo duplo de Nickase (h2): sc-406376-NIC-2
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- PegasusO plasmídeo de dupla Nickase (h2) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase Pegasus (h2) e o Plasmídeo Double Nickase Pegasus (h22) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para IKZF5. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:Pegasus Anticorpo (1B6): sc-517137
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
Pegasus Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-406376-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
O IKZF5 humano codifica o fator de transcrição com dedos de zinco Pegasus, um membro da família Ikaros que se liga ao DNA para regular programas de expressão gênica envolvidos na diferenciação de células imunes e na estabilidade de redes transcricionais. O IKZF5 está implicado no controle de processos associados à cromatina e de saídas de sinalização responsivas a citocinas que moldam estados de ativação de linfócitos e o comprometimento de linhagem. A atividade ou expressão desregulada de IKZF5 tem sido associada a fenótipos relacionados ao sistema imune e à suscetibilidade a mecanismos de doenças inflamatórias e autoimunes, sustentando sua relevância como um nó molecular em estudos de imunogenética. A edição gênica de IKZF5 permite a investigação funcional de circuitos regulatórios dependentes de Pegasus, o mapeamento de alvos a jusante por perfilamento transcriptômico e epigenômico e a geração de modelos celulares engenheirados para estudar perturbações de vias na biologia imune humana.
Pegasus O Plasmídeo de Nickase Dupla (h2) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus IKZF5 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de IKZF5. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função IKZF5. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com IKZF5 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.